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应用载体介导的RNAi技术抑制胰腺癌细胞K-RASAsn12的表达

时间:2022-10-25 09:16:06 其他范文 收藏本文 下载本文

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应用载体介导的RNAi技术抑制胰腺癌细胞K-RASAsn12的表达

篇1:应用载体介导的RNAi技术抑制胰腺癌细胞K-RASAsn12的表达

应用载体介导的RNAi技术抑制胰腺癌细胞K-RASAsn12的表达

为了研究载体介导的RNAi(RNA interference)技术特异地抑制K-RASAsn12(K-RAS第12位密码子突变形式为GAT)在胰腺癌细胞中的表达,合成两条编码针对K-RASAsn12突变特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中,构建含目的基因片段的重组质粒pSC-K-RASAsn12.同法构建含GFP基因片断的重组质粒pSC-GFP做为对照.用其分别瞬时转染人胰腺癌AsPC-1细胞和BxPC-3细胞后,经半定量RT-PCR和Western blot检测K-RAS的表达水平.结果表明构建的针对K-RASAsn12的编码突变特异性shRNA的.质粒表达载体可特异的抑制胰腺癌细胞的K-RASAsn12表达,但对野生型的K-RAS(K-RASWT)表达无影响.

作 者:孟繁杰 付泽娴 张峰 李保东 谢绍建 蔡建辉 MENG Fan-jie FU Ze-xian ZHANG Feng LI Bao-dong XIE Shao-jian CAI Jian-hui  作者单位:河北医科大学第二医院外科外科研究中心,石家庄,050000 刊 名:中国生物工程杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 26(4) 分类号:Q752 关键词:胰腺癌K-RAS   RNAi   短发夹RNA  

篇2:抑制大豆Le1基因表达的RNAi载体构建

抑制大豆Le1基因表达的RNAi载体构建

本研究采用RT-PCR克隆大豆子粒Le 1基因核心保守序列515bp片段,以植物表达载体pCAMBIA1301为基本载体,构建了抑制大豆Le 1基因表达的.RNAi载体.通过酶切检测及测序,证明表达载体构建正确.本研究为通过RNAi技术降低大豆中凝集素含量,改良大豆品质奠定了基础.

作 者:魏益凡 马建 付永平王丕武 WEI Yi-fan MA Jian FU Yong-pin WANG Pi-wu  作者单位:吉林农业大学生物技术中心,长春,130118 刊 名:吉林农业科学  ISTIC英文刊名:JOURNAL OF JILIN AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期):2010 35(3) 分类号:S565.1 关键词:大豆   大豆凝集素   RNA干扰  

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