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新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制

时间:2023-04-09 08:56:18 其他范文 收藏本文 下载本文

以下是小编帮大家整理的新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制,本文共8篇,欢迎大家分享。

新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制

篇1:新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制

新城疫病毒HN基因诱导人肺癌细胞SPC-A1凋亡的作用机制

为了探索新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因对人肺癌细胞SPC-A1的`作用及机制,将含有HN基因的重组质粒pVHN经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,通过MTT方法检测细胞活力;采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色分析肿瘤细胞凋亡;罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位(△ψm)和活性氧水平变化;流式细胞仪分析MHC-Ⅰ分子表达;底物染色反应检测caspase-3活性.结果重组质粒pVHN转染人肺癌细胞SPC-A1 48 h后,细胞活力明显降低;AO/EB染色可见明显的细胞凋亡形态学变化;与空质粒对照相比,线粒体△ψm下降(P<0.01),活性氧水平升高(P<0.05);细胞表面MHC-I分子表达上调(P>0.05);caspase-3活性增强(P<0.01).以上结果提示,新城疫病毒HN基因能够上调SPC-A1细胞表面MHC-Ⅰ分子表达,并通过上调ROS水平,下调线粒体△ψm,进而激活caspase-3,最终诱导人肺癌细胞凋亡.

作 者:连海 金宁一 李霄 陈立刚 张静敏 管国芳 孙丽丽 李雪梅 郑洪玲 崔英姬 LIAN Hai JIN Ning-Yi LI Xiao CHEN Li-Gang ZHANG Jing-Min GUAN Guo-Fang SUN Li-Li LI Xue-Mei ZHENG Hong-Ling CUI Ying-Ji  作者单位:连海,LIAN Hai(解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062;吉林大学农学部畜牧兽医学院,长春,130062)

金宁一,李霄,陈立刚,张静敏,管国芳,孙丽丽,李雪梅,郑洪玲,JIN Ning-Yi,LI Xiao,CHEN Li-Gang,ZHANG Jing-Min,GUAN Guo-Fang,SUN Li-Li,LI Xue-Mei,ZHENG Hong-Ling(解放军军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062)

崔英姬,CUI Ying-Ji(吉林大学农学部图书馆,长春,130062)

刊 名:中国生物化学与分子生物学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY 年,卷(期): 22(3) 分类号:Q255 Q75 关键词:新城疫病毒   HN基因   人肺癌细胞   凋亡  

篇2:氧化修饰LDL诱导U937细胞凋亡及其机制探讨

氧化修饰LDL诱导U937细胞凋亡及其机制探讨

用氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人髓系白血病细胞株U937细胞凋亡,并研究其作用机制.用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(TUNEL法)、流式细胞仪和DNA断裂分析检测细胞凋亡;用免疫组化检测c-fos、c-jun和c-myc蛋白表达,RT-PCR显示c-fos、c-jun和c-myc mRNA表达水平.结果表明ox-LDL可致U937细胞凋亡,其作用具有浓度效应;ox-LDL可以上调c-fos、c-jun和c-myc基因表达,使c-fos、c-jun和c-myc蛋白合成增多,最终诱导U937细胞凋亡.

作 者:杨向东 杨永宗 黎健 YANG Xiang-Dong YANG Yong-Zong LI Jian  作者单位:杨向东,杨永宗,YANG Xiang-Dong,YANG Yong-Zong(衡阳医学院心血管病研究所,衡阳,421001)

黎健,LI Jian(卫生部北京老年医学研究所,北京,100730)

刊 名:生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU英文刊名:PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年,卷(期): 27(2) 分类号:Q513 关键词:氧化修饰低密度脂蛋白   U937细胞   基因调控   细胞凋亡  

篇3:新城疫病毒HN基因的遗传变异与HI相关性的研究

新城疫病毒HN基因的遗传变异与HI相关性的研究

选取国内~分离的新城疫野毒10株,经CEF蚀斑纯化和SPF鸡胚增殖,对其血凝素-神经氨酸酶(HN)基因分别进行克隆和测序,结合在GenBank中发表的LaSota、F48E9和Clone30等参考序列,对其氨基酸序列进行遗传变异分析,绘制系统发育树.利用SPF鸡在隔离器中分别制备上述NDV毒株的`单因子阳性血清,进行血凝抑制(HI)交叉试验,计算NDV不同株之间的HI相关系数(r).利用统计学软件SPSS8.0对NDV不同株之间的HN氨基酸同源率和HI相关系数(r)进行相关比较.结果表明:NDV野毒间氨基酸高度同源,同源性为96.5%~99.8%,而与LaSota、F48E9和Clone30同源率仅为87.4%~89.9%;所有野毒均缺乏1个潜在的糖基化位点;HN基因的氨基酸同源性与HI相关系数显著相关(P<0.01,r=0.55).

作 者:秦卓明 王友令 马保臣 欧阳文军 贾强 袁小远 崔治中 QIN Zhuo-ming WANG You-ling MA Bao-chen OUYANG Wen-jun JIA Qiang YUAN Xiao-yuan CUI Zhi-zhong  作者单位:秦卓明,QIN Zhuo-ming(山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018;山东农业科学院,家禽研究所,山东,济南,250100)

王友令,欧阳文军,贾强,袁小远,WANG You-ling,OUYANG Wen-jun,JIA Qiang,YUAN Xiao-yuan(山东农业科学院,家禽研究所,山东,济南,250100)

马保臣,崔治中,MA Bao-chen,CUI Zhi-zhong(山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018)

刊 名:病毒学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY 年,卷(期): 22(5) 分类号:S858.31 关键词:新城疫病毒   HN 基因   氨基酸同源性   HI   相关性  

篇4:鹅源新城疫病毒F和HN基因的表达及功能鉴定

鹅源新城疫病毒F和HN基因的表达及功能鉴定

鹅源新城疫病毒的F和HN基因经RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pCR2.1载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,构建了F基因的表达载体(pCI-F)和HN基因的表达载体(pCI-HN).间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明:F和HN基因均能在细胞中得到较好的表达;将pCI-F和pCI-HN共转染CEF和COS细胞,转染的细胞中能形成明显的合胞体.而用pCI-F单独进行转染时,不能产生合胞体,说明F蛋白要发挥其融合作用必须要有HN蛋白的`参与,同时也进一步证明F和HN蛋白与病毒的融合特性密切相关.

作 者:胡顺林 张艳梅 孙庆 吴艳涛 刘玉良 刘秀梵 HU Shun-lin ZHANG Hai-mei SHUN Qing WU Yan-tao LIU Yu-liang LIU Xiu-fan  作者单位:扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009 刊 名:扬州大学学报(农业与生命科学版)  ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION) 年,卷(期):2006 27(4) 分类号:Q786 S852.65+9.5 关键词:鹅   新城疫病毒   F蛋白   表达   合胞体  

篇5:砷剂对肿瘤细胞的诱导凋亡作用

砷剂,主要成分为三氧化二砷(As2O3),在祖国医药中被称为砒石。几世纪以前

,砷剂就被人们用来治疗牛皮癣、风湿症、白血病、梅毒、痔疮等。目前临床上砷

剂的应用主要限于用有机砷治疗锥虫病或三氧化二砷作牙髓失活剂。哈尔滨医科大

学首先报道了静脉滴注As2O3治疗复发的急性早幼粒细胞白血病(APL)达到很高的

完全缓解率后,上海血液研究所发现As2O3可诱导APL细胞凋亡和部分分化。近年来

,国内外对砷剂与肿瘤的研究发展很快,发现砷剂对恶性淋巴系统疾病、红白血病

甚至实体瘤有令人振奋的治疗效果。现就其生化作用及对肿瘤的诱导凋亡作用作一

综述。

1 砷的生化作用

砷作为微量元素,存在于正常人体内。其化学形式可分为三价砷(无机砷)和五价砷

(有机砷),它们在体内的相互转换和代谢决定着砷的毒性作用。三价砷毒性较大,

易在体内蓄积,主要经胃肠道缓慢排泄;而五价砷则相对毒性较低,蓄积倾向低,

主要经肾脏较快排泄。进入人体后的三价砷在肝脏内还原发生甲基化,形成一甲胂

酸(MMA)或二甲胂酸(DMA),从而被解毒。

砷是一种细胞原浆毒,细胞内的相邻巯基是三价砷的主要化学受体。应用含巯基的

还原型谷胱甘肽可阻断砷剂的毒性作用。含大量巯基的还原型角蛋白结合砷剂的量

为含较少巯基的氧化型角蛋白结合砷剂量的十倍。砷剂与酶分子内的巯基作用后可

抑制其活性。受影响的重要酶系统有丙酮酸氧化酶、丙酮酸脱氢酶、磷酸酯酶、细

胞色素氧化酶、脱氧核糖核酸聚合酶、白介素1β转化酶(ICE)等,从而直接影响

了细胞的代谢过程、染色体结构、核分裂等。

线粒体是对砷剂作用最敏感的'细胞器,三价砷消耗了线粒体内亲水的巯基后,干扰

了线粒体内的离子平衡以及NAD(P)H的氧化,从而干扰了线粒体的能量代谢,引起

细胞功能的紊乱。砷剂是否对正常细胞有毒性作用取决于剂量,如As2O3治疗APL有

效血浓度及体外研究其对肿瘤细胞作用的有效浓度均在0.1μM~2.0μM,实验表明

As2O3在此浓度下对造血干细胞影响甚小[1]。

篇6:砷剂对肿瘤细胞的诱导凋亡作用

与正常细胞不同,肿瘤细胞生长失控,分化或凋亡受阻。近年来研究表明砷剂既可

诱导肿瘤细胞凋亡、部分分化,也可抑制其增殖。多项研究表明诱导凋亡为其杀伤

肿瘤细胞的主要机制。

2.1 开放MPT,活化caspase家族

研究表明,细胞凋亡发生的关键环节不在

[1] [2] [3] [4] [5] [6]

篇7:钙信号在ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用

钙信号在ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用

背景与目的:肿瘤的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是基于光敏剂选择性积聚在肿瘤组织中,肿瘤细胞接受可见光照后凋亡或坏死的一种治疗方法.细胞内游离钙作为重要的第二信使参与多种细胞功能的调节,但钙信号在PDT中的作用却不甚清楚.本研究的目的.是探讨钙信号在δ氨基酮戊酸-光动力学疗法(ALA-PDT)诱导SW480细胞凋亡及细胞自身保护机制中的作用.方法:将SW480细胞分为4组:空白对照组、激光照射组、ALA组和ALA-PDT组.用TUNEL法检测细胞凋亡;用激光共聚焦显微镜观测各组细胞内游离钙离子浓度的变化;放射免疫法测定各组细胞内cAMP及cGMP含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组细胞中钙调素的基因表达;Western蛋白印迹检测各组细胞MEK和ERK1/2蛋白产物及磷酸化蛋白产物的表达.结果:TUNEL法显示ALA-PDT组的人结肠癌细胞在PDT后30 min凋亡指数(apoptosis index,AI)为(25.26±5.04)%,60 min AI为(50.45±7.85)%;激光共聚焦结果为ALA-PDT组细胞内游离钙离子浓度在10min时荧光强度为100.00±19.83,而20 min时达185.40±18.90(P<0.01),而空白对照组、单独激光照射组、ALA组细胞内钙离子浓度无明显变化;在监测时间内,cAMP含量在30 min时为(3.215±0.245)pmol/L,显著高于其它各组及各组内不同时相的cAMP含量(P<0.001);空白对照组、激光照射组、ALA组以及ALA-PDT后30 min、60 min、90 min组的CaM3的相对表达量分别为3.97±0.29、4.28±0.39、4.51±0.44、12.60±1.84、11.39±1.13和12.77±1.35,ALA-PDT后30~90 min组的CaM3表达显著高于空白对照组、激光照射组和ALA组(P<0.001);ALA-PDT后SW480细胞的ERK通路激活.结论:钙信号对ALA-PDT诱导SW480细胞凋亡起着重要作用,同时也诱导了细胞自身的保护机制--ERK通路激活.

作 者:郑江华 时德 赵渝 陈祖林 ZHENG Jiang-Hua SHI De ZHAO Yu CHEN Zu-Lin  作者单位:郑江华,时德,赵渝,ZHENG Jiang-Hua,SHI De,ZHAO Yu(重庆医科大学附属第一医院,血管外科/重庆市普外科学重点实验室,重庆,400037)

陈祖林,CHEN Zu-Lin(第三军医大学附属新桥医院,普外科,重庆,400016)

刊 名:癌症  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF CANCER 年,卷(期): 25(6) 分类号:Q27 关键词:肿瘤   ALA   PDT   SW480细胞   钙信号   凋亡  

篇8:表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的

表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的构建及其特性研究

利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区,其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下,大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下.经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒,称为rFPV-F/HN/gB/LacZ.经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因;间接免疫荧光试验和 Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTV gB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ 感染的'CEF细胞中获得表达.与亲本毒相比,重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同.这证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因,为制备多价基因工程疫苗奠定了基础.

作 者:孙惠玲 王云峰 苗得园 张培君 智海东 徐灵龙 王玫 童光志 汪明 SUN Hui-Ling WANG Yun-Feng MIAO De-Yuan ZHANG Pei-Jun ZHI Hai-Dong XU Ling-Long WANG Mei TONG Guang-Zhi WANG Ming  作者单位:孙惠玲,SUN Hui-Ling(中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001;北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京,100094)

王云峰,智海东,徐灵龙,王玫,WANG Yun-Feng,ZHI Hai-Dong,XU Ling-Long,WANG Mei(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)

苗得园,张培君,MIAO De-Yuan,ZHANG Pei-Jun(北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京,100094)

童光志,TONG Guang-Zhi(中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)

汪明,WANG Ming(中国农业大学动物医学院,北京,100094)

刊 名:生物工程学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年,卷(期):2006 22(6) 分类号:Q78 关键词:重组鸡痘病毒   新城疫病毒   传染性喉气管炎病毒   F基因   HN基因   gB基因  

银杏内酯B对培养星形胶质细胞的抗缺血作用及其机制

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