今天小编在这给大家整理了人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达，本文共6篇，我们一起来看看吧！
篇1：人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达
人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达
为大量获取人胰高血糖素样肽-1,利用基因串联的方法构建了人胰高血糖素样肽-1的一组串联体.将化学合成的人胰高血糖素样肽-1(human glucagon-like peptide-1,hGLP-1)cDNA基因插入质粒载体pET-32a(+)中,构建成硫氧还蛋白(thioredoxin)及六聚组氨酸(hexahistidine)与rhGLP-1的融合表达载体pET32-GLLP-1.在此基础上将该融合基因序列进行同向串联,获得二串和三串的表达载体pET32-GLP-1-2和pET32-GLP-1-3.将该三种表达载体转化大肠杆菌BLR(DE3)后获得相应的基因工程菌.结果表明:三种基因工程菌经发酵和IPTG诱导后均正确表达目的蛋白,目的.蛋白表达量随着基因串数的增加而得到一定提高,重组蛋白经分离纯化后进行生物学活性测试具有明显的降低血糖浓度作用.
作 者： 作者单位： 刊 名：华东师范大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF EAST CHINA NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE) 年，卷(期)： “”(4) 分类号：Q78 关键词：胰高血糖素样肽-1 串联体 表达篇2：胰高血糖素样肽-1与受体相互作用研究进展
胰高血糖素样肽-1与受体相互作用研究进展
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)具有促胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、刺激胰岛β细胞的增殖和分化、抑制β细胞凋亡、抑制胃排空等作用,近年来成为治疗糖尿病药物研究中的热点.GLP-1与受体的`相互作用一直备受关注,我们从4个方面对GLP-1与受体相互作用的研究进行了综述:GLP-1的二级结构、GLP-1单个残基改变及残基闻的相互作用、GLP-1不同残基片段对GLP-1结合并激活受体的影响和GLP-1受体的相互作用模式.
作 者：聂新华 张涛 郑学仿 李元 曹洪玉 唐乾 NIE Xin-Hua ZHANG Tao ZHENG Xue-Fang LI Yuan CAO Hong-Yu TANG Qian 作者单位：聂新华,张涛,郑学仿,曹洪玉,唐乾,NIE Xin-Hua,ZHANG Tao,ZHENG Xue-Fang,CAO Hong-Yu,TANG Qian(大连大学,生物工程学院,辽宁,大连,116622)李元,LI Yuan(大连帝恩生物工程有限公司,辽宁,大连,116600;陕西省人民医院,陕西,西安,710068)
刊 名：生物技术通讯 ISTIC英文刊名：LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 21(2) 分类号：Q26 关键词：胰高血糖素样肽-1 受体 相互作用 截短有效的胰高血糖素样肽-1篇3：重组人胰高血糖素样肽-1的表达及生物学活性
重组人胰高血糖素样肽-1的表达及生物学活性
将人工合成的人胰高血糖素样肽-1(human glucagon-like peptide-1,hGLP-1)基因插入质粒载体pET-32a(+)中,构建成rhGLP-1与硫氧还蛋白(thioredox)及六聚组氨酸(hexahistidine)的融合表达载体pET32-GLP-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株,经IPTG诱导发酵的.菌体超声破碎后,裂解液用Ni离子亲和层析纯化得到融合蛋白,经肠激酶裂解,再次Ni离子亲和层析,得到rhGLP-1样品.经SDS-PAGE和等电聚焦检测,样品纯度大于90%,等电点介于pH5.2～pH5.85之间.质谱测定rhGLP-1分子量为3 355.0kDa,肽图分析得到2 097.7kDa和1 005.5kDa两个胰蛋白酶酶解片断,均与理论分析结果一致.动物实验表明重组蛋白具有明显的降血糖活性和促胰岛素分泌作用.
作 者：黄静 徐进 左翼 徐伟东 吴自荣 HUANG Jing XU Jin ZUO Yi XU Wei-dong WU Zi-rong 作者单位：华东师范大学生命科学学院,上海,62 刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 26(1) 分类号：Q786 关键词：胰高血糖素样肽-1 表达 生物学活性篇4：表达人胰高血糖素样肽前药工程菌遗传稳定性
表达人胰高血糖素样肽前药工程菌遗传稳定性
通过传代培养的方法,研究高表达重组人胰高血糖素样肽前药(Pro-rhGLPs)的工程菌E.coli BL21(DE3)/pET41a(+)-hGLPs的遗传稳定性,观察菌体和菌落形态,比较在有无选择压力下的质粒稳定性,酶切和测序鉴定重组基因片断的正确性,SDS-PAGE电泳证实重组蛋白质的`表达量的稳定性,在C57BL/6小鼠上进行葡萄糖耐量实验检测重组蛋白生物学活性.结果显示:此工程菌连续传代过程中,保持大肠杆菌的典型特征,各代质粒的酶切鉴定和测序正确,重组蛋白表达水平及生物活性也无显著差异.因此,工程菌E.coli BL21(DE3)/pET41a(+)-hGLPs具有良好的遗传稳定性.
作 者：周颖 马雪 侯征 薛小燕 陈瑛瑛 罗晓星 ZHOU Ying MA Xue HOU Zheng XUE Xiao-yan CHEN Ying-ying LUO Xiao-xing 作者单位：第四军医大学,药学系药理学教研室,西安,710032 刊 名：生物加工过程 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING 年，卷(期)： 8(2) 分类号：Q78 关键词：人胰高血糖素样肽 遗传稳定性 前药 hGLP-1 genetic stability prodrug篇5：人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究
人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究
目的 克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽,检测其生物活性.方法 人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽.通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性.结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、胃癌7901细胞(SGC-7901)半数抑制浓度IC50为36 μg/ml、47μg/ml,显著低于内皮抑素IC50179μg/ml、202 μg/ml.CAM实验中30肽对血管的'抑制作用更强.30肽在小鼠体内抑瘤率47.8%,效果优于内皮抑素28.7%.结论 30肽具有更强抗肿瘤活性,有可能成为治疗肿瘤的一种新药物.
作 者：李丹 刘兴汉 赵炜明 李冀宏 马洪星 张宇雯 栗亚 LI Dan LIU Xinghan ZHAO Weiming LI Jihong MA Hongxing ZHANG Yuwen LI Ya 作者单位：哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室,黑龙江省生物医药工程重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地,哈尔滨市,150081 刊 名：医学分子生物学杂志 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 4(6) 分类号：Q78 关键词：内皮抑素 RGD序列 克隆 基因表达 抗肿瘤活性篇6：人α-防御素基因克隆及其毕赤酵母表达的研究
人α-防御素基因克隆及其毕赤酵母表达的研究
为探讨人α-防御素(HNP2)酵母表达,根据HNP2氨基酸序列和巴斯德毕赤酵母密码偏爱性,设计HNP2基因序列片段,构建pGAPZαA-HNP2酵母表达载体,转化E.coliJM109,扩增重组子,经限制性核酸内切酶BlnI线性化,转毕赤酵母.PCR扩增挑选阳性转化子,SDS-PAGE分析酵母表达,利用阳离子交换树脂纯化HNP2,开展抗菌试验.结果显示转入巴斯德毕赤酵母HNP2基因得到表达,表达的HNP2具有显著的`抗菌作用.
作 者：李再新 罗惠波 周键 左勇 刘达玉 LI Zai-xin LUO Hui-bo ZHOU Jian ZUO Yong LIU Da-yu 作者单位：四川理工学院生物工程系,四川,自贡,643000 刊 名：分子科学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCE 年，卷(期)：2006 22(4) 分类号：Q81 关键词：人α-防御素 克隆 酵母表达 抗菌活性
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