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植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用

时间:2022-06-14 08:00:28 其他范文 收藏本文 下载本文

下面是小编为大家整理的植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用,本文共10篇,仅供参考,喜欢可以收藏与分享哟!

植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用

篇1:植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用

植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用

近年来,植物G蛋白(包括异三聚体G蛋白、小G蛋白及超大G蛋白)的存在受到人们的普遍关注,同时它在细胞信号转导过程中起着重要作用,已成为人们研究信号调控的.热点问题.阐述了已发现的植物G蛋白的种类,总结了异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用.

作 者:沈雪梅 Shen Xuemei  作者单位:南京农业大学生命科学学院,江苏南京,210095 刊 名:安徽农学通报 英文刊名:ANHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年,卷(期): 15(15) 分类号:Q81 关键词:异三聚体G蛋白   小G蛋白   细胞信号转导  

篇2:AGS3蛋白与G蛋白信号转导

AGS3蛋白与G蛋白信号转导

AGS3蛋白是影响受体到G蛋白的信号转导或直接影响非受体依赖型G蛋白激活的蛋白质之一.AGS3蛋白在脑、睾丸、肝脏、肾脏、心脏、胰腺及PC-12细胞中普遍分布.它不仅具有不依赖受体的`Gβγ信号转导激活物的作用,也能作为二磷酸鸟苷(GDP)的解离抑制剂,并负向调节G蛋白偶联受体对G蛋白的激活.AGS1、AGS2、AGS4是AGS家族的其它几个成员,能选择性激活不同类型的G蛋白.LGN和PINS蛋白是AGS3的同系物.AGS3蛋白与信号转导的关系是目前研究的热点之一.

作 者:邸瑶 夏时海 佟长青 DI Yao XIA Shi-Hai TONG Chang-Qing  作者单位:邸瑶,佟长青,DI Yao,TONG Chang-Qing(武警医学院生理学教研室,天津,300162)

夏时海,XIA Shi-Hai(武警医学院附属医院消化内科胰腺中心,天津,300162)

刊 名:生理科学进展  ISTIC PKU英文刊名:PROGRESS IN PHYSIOLOGICAL SCIENCES 年,卷(期): 37(3) 分类号:Q5 关键词:G蛋白   信号转导   AGS蛋白  

篇3:植物G蛋白与植物防卫反应

植物G蛋白与植物防卫反应

近年来,植物G蛋白(包括异三聚体G蛋白和小G蛋白)的存在及其信号调控途径已经成为人们研究细胞信号转导过程的热点问题.从多种植物细胞中相继分离克隆出多个与动物G蛋白同源的编码植物G蛋白的基因,并且植物G蛋白的种类和数量有其独特性.植物G蛋白在植物细胞跨膜信号转导中发挥重要的.作用,参与多种生命活动的调控.主要综述了植物G蛋白参与植物防卫反应调节作用的研究进展.

作 者:宋水山 杨文香 李亚宁 刘大群 SONG Shui-shan YANG Wen-xiang LI Ya-ning LIU Da-qun  作者单位:宋水山,SONG Shui-shan(河北农业大学生命科学学院,保定,071001;河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,保定,071001)

杨文香,李亚宁,刘大群,YANG Wen-xiang,LI Ya-ning,LIU Da-qun(河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,保定,071001)

刊 名:中国生物工程杂志  ISTIC PKU英文刊名:CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期):2006 26(3) 分类号:Q81 关键词:植物G蛋白   植物防卫反应   细胞信号转导  

篇4:植物中叶片蛋白的提取

一、实验目的

熟悉植物叶蛋白的几种提取原理和方法,了解其意义及其应用价值。

二、实验原理

植物叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concentration,简称LPC),是从新鲜植物叶片中提取的高质量浓缩蛋白质,不仅是畜禽生长发育和生产畜产品的主要营养物质,而且目前也正成为人类的保健营养理想食品之一。天然蛋白存在于为数甚多的植物体内,对其分离应依据人们的利用目的及提取蛋白含量和品质加以考虑。

天然蛋白质一般在溶液中呈稳定的亲水胶体状态,故LPC 亦称叶蛋白胶。其特点是:

(1)水化作用 即蛋白质分子表面附有能有效防止蛋白质分子沉淀析出的水化膜;(2)电荷排斥作用 水化膜外还有电荷层(具阴、阳离子)能有效地防止蛋白质分子的凝集。故溶液蛋白质颗粒(溶质)呈溶解状态;(3)欲提取植物组织中的蛋白质必须利用溶解度的差异进行分离纯化(如盐析、有机溶剂分级沉淀法、疏水层析、结晶、加热、离心分离等法),利用分子大小和形状差异进行分离纯化(分子筛层析法);还可利用电荷性质的差异分离纯化(离子交换法)。只要创造上述影响因素,即可使蛋白质从植物叶片中分离并沉淀出来。

植物叶蛋白提取一般遵循如下基本原则:尽可能提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;减少对蛋白质的人为修饰;破坏蛋白与其他生物大分子的相互作用,并使蛋白质处于完全变性状态。根据该原则,植物叶蛋白制备过程中一般需要有四种试剂①离液剂:尿素和硫脲等;②表面活性剂:又称去垢剂,早期常用NP-40、Tritonx-100等非离子型去垢剂,离子型去垢剂有SDS、胆酸钠、LiDS 等,还有象CHAPS(含它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂;

③还原剂:DTT、DTE、TBP、Tris-base 等;④蛋白酶抑制剂及核酸酶:EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等,如为了去除缓冲液中存在的'痕量重金属离子,可在其中加入0.1~5mmol/LEDTA,同时使金属蛋白酶失活。

三、仪器和试剂

仪器

离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。

试剂

1. 20mL 样品提取缓冲液:2.5mL 0.5mol/LTris-HCl

3. -20℃下预冷丙酮(含0.07%β-巯基乙醇)

4. -20℃预冷的80%丙酮(含0.07%β-巯基乙醇)

5. 饱和硫酸铵溶液 称取(NH4)2SO4 80g,加蒸馏水100mL,加热50~60℃,搅拌溶解,室温过夜,用浓氨水调pH 至7.0

6. 0.05molpH7.0的磷酸缓冲液10%NaCl 0.1mol 醋酸95%乙醇

7. 植物叶片(草本植物、木本植物叶片等都可)

四、 实验步骤

植物叶蛋白的提取主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、加热法(含逐步和快速加热)、 离心分离法、结晶和重结晶法等。依据今后的开发方向(以饲料为基础,以食品、饮品为开发方向)及简便易行和使用的原则,主要采用盐析法、加热法和有机溶剂法分离提取叶蛋白(冷提和热提)。不同的提取方法,对样品的处理方式、程度和要求不同,结果也有差异。

(一)(NH4)2SO4 沉淀法提取叶蛋白

取0.3g 植物叶蛋白,用液氮充分研磨转入离心管中,加入3mL 提取缓冲液,摇匀并放在4℃条件下提取1h,充分溶解蛋白后,4℃10000r/min 离心20min,弃沉淀,上清液中加入(NH4)2SO4 ,混匀1h,按1:2(v/v)加入-20℃预冷的80%丙酮,混匀后4℃1r/min 离心10min,沉淀在-20℃冰箱中放置20min,使丙酮完全挥发后加适量上样缓冲液,待沉淀充分溶解后,4℃12000r/min 离心5min,取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。

(二)改良丙酮沉淀法提取叶蛋白

取0.3g 左右的植物叶片,用液氮研磨,色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP,并将充分研磨过的样品转入离心管中,加入4mL 的提取缓冲液,摇匀并放在4℃条件下提取1h,充分溶解蛋白。放置后的样品充分摇匀,4℃10000r/min 离心30min,弃沉淀,上清液中加入

2.5~3倍体积的村-20℃条件下过夜,让蛋白充分沉淀。之后,4℃10000r/min 离心30min,其上清,沉淀置于-20℃下,使丙酮完全挥发,如有必要加入上样缓冲液溶解沉淀。缓冲液用量300ul,沉淀充分溶解后,转移至1.5mL 离心管中,4℃12000r/min 离心15min ,取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。

该方法提取的蛋白质,提取效率高,杂质干扰少,电泳结果蛋白条带清晰,数量多。

(三)植物叶片总蛋白的提取―三氯醋酸―丙酮沉淀法

①在液氮中研磨适量的叶片;

②悬浮于含10%的三氯醋酸和含0.07%β-巯基乙醇(可用DTT 代替)的丙酮溶液在-20℃条件下冰浴;

③让蛋白质沉淀过夜后离心(4℃ 10000r/min 离心30~60min),弃上清;

④重悬沉淀浮于含0.07%β-巯基乙醇的预冷丙酮溶液中;

⑤离心(同上)后真空干燥沉淀;

⑥用上样缓冲液溶解沉淀,离心;

⑦Brandford 法定量蛋白,然后分装至Eppendof 管中保存在-78℃备用。

(四)分步提取可溶性叶蛋白

(1)蛋白质浸出 ①水溶性蛋白质浸出:用0.05molpH7.0的磷酸缓冲液(或蒸馏水)将样品制成匀浆液,然后离心15min(4000r/min),收集上清液即蛋白质浸出液,再将沉淀物按上述操作重复两次。②盐溶性蛋白质浸出用10%NaCl 将前者剩余沉淀物分离提取两次,收集蛋白质浸出液。

(2)蛋白质沉淀用0.1mol 醋酸将蛋白质浸出液pH 值调至蛋白质等电点(pH4.5左右),即8体积蛋白质浸出液加入1体积0.1mol 醋酸,混匀,离心15min(3000r/min),弃去上清液,沉淀物即为可溶性叶蛋白。

(3)蛋白质收集于沉淀物中加入95%乙醇,混匀,用定量滤纸过滤或抽滤,待风干后收集。

篇5:电离辐射后ERp29蛋白在IEC-6细胞中的表达

电离辐射后ERp29蛋白在IEC-6细胞中的表达

目的探讨大鼠空肠上皮细胞株(IEC-6)受到不同剂量γ射线照射后,ERp29蛋白(endoplasmic reticulum protein)在不同时相点的.表达变化情况.方法分别提取正常IEC-6细胞和5、10、15、20 Gy照射后3、12、24、48、72 h细胞的蛋白样品,采用Western blotting方法检测ERp29的表达.结果不同剂量照射后IEC-6 ERp29蛋白表达比正常细胞高,蛋白表达随照射时间的增加而增加.结论电离辐射可诱导IEC-6细胞高表达ERp29蛋白,提示该蛋白在肠道的损伤修复中起重要作用.

作 者:杨媛 章波 王蒙 艾国平粟永萍 YANG Yuan ZHANG Bo WANG Meng AI Guo-ping SU Yong-ping  作者单位:第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 刊 名:免疫学杂志  ISTIC PKU英文刊名:IMMUNOLOGICAL JOURNAL 年,卷(期): 22(3) 分类号:Q344.13 关键词:ERp29   电离辐射   肠上皮细胞   Western blotting  

篇6:乳糖诱导植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein在大肠杆菌中的表达

乳糖诱导植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein在大肠杆菌中的表达

构建了植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein高效表达的工程菌株,对其乳糖诱导条件进行了优化.乳糖浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示,高浓度乳糖对菌株生长有抑制作用(P<0.01),对目的蛋白的表达无显著影响(P>0.05),时间延长对于菌株生长有利(P<0.01),对目的蛋白的表达因温度不同而不同.进一步的研究表明,以0.5 乳糖在28℃~30℃诱导4h对菌株生长和目的蛋白的.表达有利,目的蛋白的表达量可达20左右.

作 者:李春丽 陈其新 何国庆 LI Chun-Li CHEN Qi-Xin HE Guo-Qing  作者单位:李春丽,LI Chun-Li(河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州,310019)

陈其新,CHEN Qi-Xin(河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;甘肃亚盛集团博士后科研工作站北京分站,北京,100101)

何国庆,HE Guo-Qing(浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州,310019)

刊 名:生物工程学报  ISTIC PKU英文刊名:CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年,卷(期):2006 22(6) 分类号:Q786 关键词:植物甜蛋白   大肠杆菌   乳糖   优化  

篇7:谈乙烯信号转导及其在植物逆境响应中的作用论文

乙烯是一种结构简单的小分子化合物,作为一种重要的气态植物激素,参与调节植物生长发育的多个过程;此外,乙烯也在植物响应生物和非生物胁迫过程中起重要的调控作用。典型的乙烯反应是黑暗条件下幼苗生长呈特别的“三重反应”,在拟南芥中表现为下胚轴变粗变短,主根生长受到抑制,并且顶端弯钩加剧。

依据“三重反应”表型,在模式植物拟南芥中鉴定了一系列乙烯反应的突变体。通过对突变体进行分子遗传学研究,在拟南芥中建立了从内质网膜上对乙烯信号感知到细胞核内转录调控的一条线性乙烯信号转导模型。拟南芥乙烯受体家族由5 个成员构成,ETR1、ERS1、ETR2、ERS2 和EIN4,正常情况下,乙烯受体处于激活状态,与一个Raf 类的Ser/Thr 蛋白激酶CTR1 结合并定位在内质网膜上,当乙烯结合到受体上时会改变其构象,使其进入无活性或关闭状态,处于关闭状态的受体无法与CTR1 结合;失活后的受体-CTR1复合体不再磷酸化下游组分EIN2,此时EIN2 因不被降解而激活,使得乙烯信号得以向下游传递。EIN2 定位于细胞的内质网膜,EIN2 的C端可以发生剪切并进入细胞核激活乙烯的下游信号分子。位于EIN2 下游的是EIN3/EILs 转录因子,激活的乙烯信号会阻断F-box 蛋白成员EBF1 和EBF2 介导的EIN3 降解;EIN3/EIL1 作为乙烯信号传递中的初级转录因子激活ERFs、EBF2、PORA 和PORB 等下游基因表达,完成乙烯应答反应。本文主要以模式植物拟南芥为例,对乙烯受体、乙烯信号转导途径的关键组分及其分子调控的最新研究进展进行综述;同时对乙烯信号转导在植物响应逆境胁迫反应中的作用进行探讨。

1 乙烯受体及其调控因子

乙烯信号的感知开始于乙烯分子与其受体的相互识别和结合,乙烯与其受体的高度亲和需要铜离子(Cu+)作为辅助因子。在模式植物拟南芥中共发现5 个乙烯受体蛋白,包括ETR1、ERS1、ETR2、ERS2 和EIN4 ;乙烯受体定位于内质网膜上,以负反馈形式控制乙烯信号的输出。根据乙烯受体蛋白氨基酸序列的相似性,5 个受体成员又进一步分为了两个亚族,亚族1 包括ETR1 和ERS1,亚族2 包括ETR2、ERS2 和EIN4。乙烯受体蛋白结构比较保守,与细菌和真菌中存在的双组分蛋白激酶结构类似,N 末端为结合乙烯的疏水性跨膜域;中部有1个保守的GAF 域;C 末端有一个与下游信号组分蛋白互作相关的组氨酸激酶信号输出域。研究发现,进化上保守的RTE1(REVERSIONTO-ETHYLENE SENSITIVITY1)能够与乙烯受体互作并且负调控乙烯反应。RTE1 在真核生物中普遍存在,已从不同物种中克隆了RTE1 同源基因,例如番茄的SlGR 和SlGR1 等。遗传分析表明,拟南芥RTE1 特异性地作用于乙烯受体ETR1,对其它的乙烯受体没有显著影响。为了深入了解RTE1的分子调控作用,Chang 等通过Split-Ub 筛选得到了RTE1 的互作蛋白细胞色素b5 和一个脂类转运蛋白分子LTP1,初步分析表明细胞色素b5 和LTP1 参与乙烯受体ETR1 信号转导的分子调控。2 乙烯信号转导中的内质网- 核桥接通路CTR1 是乙烯受体下游的另一个负调控因子。CTR1 的N 端可以与内质网上的乙烯受体相结合。利用Co-IP 分析在体内与CTR1 结合蛋白发现,可以从内质网组分中纯化得到ETR1 蛋白,直接证明CTR1 存在于内质网并与ETR1 形成复合物。CTR1 的C 端具有类似于哺乳动物Raf 的丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶的结构,体外磷酸化实验表明CTR1具有丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶活性,活性特征类似于Raf1,但是CTR1 与Raf 相比,缺少锌指结构和结合Ras 蛋白的结构域,说明CTR1 与MAPKKK 还存在一定的不同。

EIN2 是位于CTR1 下游的乙烯信号转导组分,EIN2 的功能缺失突变体对乙烯完全不敏感,是乙烯信号转导中的正调控组分。EIN2 基因编码一个定位于内质网膜的跨膜蛋白。研究结果表明,EIN2 的N端作为一个跨膜结构接受上游的信号,而C 端参与了乙烯的信号转导并将信号向下转导,即EIN2 激活下游乙烯信号的“剪切、穿梭”模型。当细胞内乙烯浓度较高时,EIN2 被激活且其C 端(CEND)被蛋白酶剪切而脱离内质网进入细胞核并以某种方式激活EIN3/EIL1 和乙烯反应。Li 等发现细胞质中的EIN2 识别并结合EBF1/2 mRNA 的3'-UTR,并通过招募EIN5 等相关调节因子形成点状结构P-body,进而抑制EBF1/2 mRNA 的翻译,导致EBF1/2 蛋白含量急剧减少,使得EIN3/EIL1 在细胞核内大量积累,从而激活下游乙烯反应。3 乙烯信号下游的转录调控因子EIN3 编码一个细胞核内的转录因子蛋白,在乙烯信号转导途径中位于EIN2 下游。拟南芥中有5 个EIN3 的类似蛋白EILs(EIN3-like proteins),分别为EIL1-EIL5,对拟南芥EIN3/EILs 家族6 个成员的研究发现,其中EIL1 与EIN3 的相似度最高,正调控拟南芥乙烯反应。EIN3/EIL1s 作为转录因子直接结合下游的ERF 基因启动子上的特定DNA 序列,来诱导ERF 基因的转录。属于泛素连接酶类的SCF 复合体中的两种F-box 蛋白EBF1/EBF2 位于EIN3/EILs 上游,可以在细胞核内直接与之发生互作。EBF1 和EBF2 调控EIN3/EIL1 蛋白的积累和稳定性,间接对乙烯反应起负调控作用。同时EIN3/EIL1可作为连接乙烯信号和茉莉酸信号调控植物发育和逆境胁迫。

篇8:谈乙烯信号转导及其在植物逆境响应中的作用论文

4.1 在盐胁迫响应中的作用

盐胁迫是影响植物生长最主要的逆境因素之一,乙烯作为一种逆境胁迫响应激素在植物抗盐过程中起着重要的作用。一定水平的乙烯合成速率有利于增强植物体的盐胁迫抗性,例如,乙烯合成前体ACC 处理可以显著增加野生型拟南芥幼苗在高盐环境下的'抗盐能力和成活率。同时,盐胁迫也会诱导乙烯的合成。高盐胁迫下,拟南芥中ACC 合成酶基因AtACS4 和AtACS7 的表达水平明显提高;烟草中NtACS1、NtACO1、NtACO2 和NtACO3 基因的表达也受盐胁迫的诱导[24]。此外,乙烯信号转导途径中的各个组分也参与植物的盐胁迫反应。研究发现,在盐和渗透胁迫条件下,拟南芥乙烯受体基因ETR1 的转录水平和蛋白丰度都显著下降;与野生型相比,功能获得性突变体etr1-1、ein4-1 和etr2-1 在种子萌发和幼苗生长发育阶段表现出对盐的敏感性;相反,功能缺失突变体etr1-7 则表现出耐盐的表型特征。在烟草中也发现,烟草乙烯受体基因NTHK1 受盐诱导,异源表达烟草NTHK1 的转基因拟南芥对盐的敏感性明显增加,而且也改变了盐应答相关基因的表达,例如促进了AtERF4,COR6.6,RD17,RD21A 和VSP2基因的表达,但抑制了BBC1,LEA 和AtNAC2 基因的表达。乙烯信号转导的负调控因子CTR1也参与植物的盐胁迫反应。与野生型相比,ctr1-1 突变体在种子萌发和幼苗生长阶段表现组成型的乙烯反应和盐胁迫抗性。EIN2 在响应盐胁迫的过程中起着正调控作用,拟南芥功能缺失突变体ein2-1和ein2-5 在种子萌发、幼苗生长及营养生长阶段都表现出盐敏感的表型,种子萌发和幼苗生长均延迟。EIN3 是乙烯信号转导中的正调控因子,在盐胁迫下,EIN3 的表达水平达到最大,EIN3 蛋白积累。拟南芥功能缺失突变体ein3-1 对盐的敏感性明显增加;过表达EIN3 株系则表现出较强的耐盐性。作为乙烯信号途径下游组分,ERFs 转录因子家族通过识别不同的顺式作用元件,调节多种功能基因的表达,参与植物逆境胁迫应答。许多ERF基因,例如拟南芥AtERF1、AtERF5、ESE1、ESE2、ESE3,小麦TaERF1,大豆GmERF7,茉莉酸和乙烯响应因子JERF1/3 的表达都受乙烯和盐胁迫诱导。拟南芥Aterf98-1、白菜BrERF4、枸杞子LchERF、苜蓿MsERF11 和番茄SlERF5 基因的过表达都提高了转基因株系的盐胁迫抗性。综上可见,无论是外施乙烯还是过表达乙烯合成基因,或是加强乙烯信号转导,都会增加植物对盐胁迫的耐受性。但也有报道指出,增加体内乙烯含量会提高植物对盐胁迫的敏感性,例如,ACS7 和MPK9 在促进乙烯合成后又导致植物对盐敏感性增加;在水稻中SIT1 促进乙烯合成后降低耐盐性,并且过表达OsEIL1 或OsEIL2 都使植物对盐敏感性增加。这些结果表明乙烯的动态平衡在植物的盐胁迫反应中可能发挥更重要的作用。

4.2 在干旱胁迫响应中的作用

干旱是影响农业生产的主要非生物胁迫因子,严重威胁着作物的生存及其产量。研究显示,干旱胁迫下植物体内积累乙烯并影响植物的抗旱能力。大豆中干旱胁迫上调乙烯合成相关基因的表达,但抑制乙烯信号途径中的CTR1 表达。利用基因沉默技术抑制转基因玉米中的乙烯水平,能显著提高干旱环境下的玉米产量。干旱环境下,植物通过调控基因表达实现对环境条件的适应,其中在转录水平的调控研究较多。植物中有许多胁迫相关的转录因子家族,例如bZIP、WRKY、AP2/ERF 和MYB等。其中ERF 转录因子早期被称作乙烯应答元件结合蛋白(EREBP),是植物特有的一类转录因子,属于AP2/ERF 转录因子家族。在已经发现的ERF 转录因子中,一部分ERF 转录因子通过与GCC-box 的结合调控植物抗病相关基因及其它信号途径的基因表达;另一部分ERF 转录因子则通过与DRE 顺式作用元件的结合调控植物对非生物胁迫的响性。目前已经证实了很多ERF 类转录因子与植物抗旱性有关。在烟草乙烯不敏感突变体中,干旱胁迫可诱导烟草NtAP2 和NtERF 基因家族成员的高水平表达,耐旱性显著提高[48]。在水稻、烟草、番茄和小麦中过表达JERF3,GmERF3,SlERF5,可提高对干旱胁迫的抗性。同时,ERF 转录因子在植物胁迫应答中,除了作为转录激活子激活植物胁迫相关的基因表达外,某些ERF 转录因子也可作为转录抑制子,抑制某些胁迫相关基因的表达,例如,拟南芥中的ERF 转录因子RAP2.1 可以在体内直接和干旱和低温响应的功能基因(RD/COR)启动子区域的DRE 元件结合从而抑制这些基因的表达。拟南芥AtERF4 也通过负调节植物防卫基因PDF1.2的表达,进而调控乙烯反应;在拟南芥中过量表达AtERF4 将导致植株对干旱更为敏感。

4.3 在低温胁迫响应中的作用

与其他环境胁迫不同,低温胁迫下植物体内乙烯含量明显降低并维持在较低水平。乙烯合成基因过表达或外施ACC 会提高内源乙烯含量从而降低植物体的耐寒性;相反,外施乙烯抑制剂AVG 或AgNO3 时则会增强植物体对低温的抵抗能力,说明乙烯在植物响应低温胁迫中起负调控作用。另外,乙烯不敏感突变体如etr1-1、ein4-1、ein2-5、ein3-1和ein3 都表现出抗寒性增强,过表达EIN3 则会降低植物的抗寒性。

乙烯参与植物抗寒性主要是通过CBF 依赖的冷响应基因和A- 型的ARRs 基因而实现的。CBF 基因属于AP2/ERF 转录因子家族中的成员,调控上百种COR 基因的表达,它们的启动子含有保守基序CCGAC,称为CRT/DRE 顺式调节元件。CBF 可以识别并结合启动子区的CRT 序列,调控这类COR基因的表达。拟南芥中参与低温信号途径的CBF 基因有3 个,CBF1/DREB1B、CBF2/DREB1C 和CBF3/DREB1A。CBF1和CBF3敲除株系表现冷敏感的表型,cbf2 缺失突变体植株则表现抗低温;拟南芥中过表达CBFs 植株表现出比野生型植株更加抗冷、抗旱和抗盐的表型;说明CBFs 是低温信号途径中的正调控因子。还有一些AP2/ERF 转录因子也参与植物的低温胁迫应答。例如,TERF2/LeERF2 可结合ACS,ACO 等乙烯合成基因的启动子元件,激活它们的表达,乙烯进而激活低温胁迫相关基因PRB-1b,Osmotin 的表达,提高植物对低温的耐受性。过表达烟草TERF2 的番茄植株体内的渗透调节物质含量和叶绿素水平明显提高,ROS、MDA 含量和离子渗漏明显降低;同时还激活了低温相关基因OsFer1,OsTrx23 和OsLti6 等的表达,对低温胁迫的抗性明显提高;而反义表达TERF2 的番茄植株则降低了对低温的耐受能力,但喷施外源乙烯可恢复番茄植株的低温抗性,表明TERF2 通过乙烯信号途径来调控对低温胁迫的抗性反应。在葡萄中,低温促进乙烯释放,施用乙烯合成抑制剂降低其抗冷性,而过量表达VaERF057 则提高转基因拟南芥的抗冷性,说明乙烯在调控植物的低温胁迫反应中作用不同,可能与植物种类有关。

4.4 在生物胁迫响应中的作用

乙烯不仅在植物的非生物胁迫响应中发挥作用,植物中还存在大量与生物胁迫响应有关的ERF 型转录因子。拟南芥AtERF1、AtERF2 和AtERF14 基因通过乙烯和茉莉酸信号转导途径,在抵抗生物胁迫过程中起着至关重要的作用,过表达AtERF2 表现出较强的抗病性以及能诱导大量抗病相关基因的表达。转基因植株中过量表达海岛棉乙烯反应相关因子GbERF1,通过激活木质素合成提高了黄萎病抗性。烟草中分离的Tsi1 基因,特异地与GCC盒和DRE/CRT 元件结合;过表达Tsi1 的转基因烟草植株对盐胁迫和细菌的耐受能力明显提高。在拟南芥中超量表达番茄基因Pti4,能够激活水杨酸调控基因PR1、PR2 的表达,同时激活茉莉素及乙烯调控基因PR3、PR4、PDF1.2 和Thi2.1 的表达。番茄Pti4 在拟南芥中超表达也提高了其对真菌病原物和细菌病原物的抵抗能力。研究表明,植物激素参与不同的防御相关基因的激活,在激素介导的逆境胁迫防御中起着重要的桥梁作用。

5 展望

乙烯信号转导是一个复杂的分子调控过程,信号传导途径的每个重要组分在不同分子水平上受到严格的调节和控制。过去几年,虽然人们对乙烯信号传导途径及其重要组分的分子调控取得了一些进展,但关于乙烯信号转导的分子机制和乙烯反应调控因子的作用机制仍远未探究清楚,很多乙烯反应和乙烯信号转导的重要调控因子尚未挖掘出来。特别是乙烯受体的调控因子有哪些,乙烯受体的信号转导如何调控,调控因子的分子作用机制等,都是亟需回答的重要科学问题。同时,乙烯信号传导途径并不是独立存在的,与其它植物激素如生长素、赤霉素、脱落酸等具有交互作用,因此,通过继续挖掘每个信号组分的功能与作用机制,从而建立完善的乙烯信号网络可以为今后构建植物各个生理阶段的激素互作调控模型奠定基础。近年来全球气候变暖,人口数量增加,环境条件恶化,植物所面临的生存逆境,如高温、干旱、高盐、低温及病害等问题日趋严峻,对农业生产构成了较大的威胁。目前,植物激素的抗逆机理受到科研工作者的高度关注,乙烯同植物抗逆性的关系研究取得了一定的进展,初步认识到乙烯在植物抗逆性中的复杂作用。但是,乙烯在植物响应逆境胁迫过程中的具体调控机制尚不明确,逆境胁迫下乙烯的作用机理有待于进一步深入探索,特别是如何应用乙烯来合理调控植物的生长发育,增强植物的环境适应能力,最终培育筛选出抗性高产的优良品种。

篇9:病毒蛋白R在HIV-1生命周期中的作用

病毒蛋白R在HIV-1生命周期中的作用

病毒蛋白R(viral protein regulatory,Vpr)是HIV-1的辅助蛋白,它可以调节逆转录的保真性,促进整合前复合物的核运输,影响细胞周期进程,诱导细胞凋亡,并对宿主及病毒的基因表达具有调节作用.它的多重作用使人们对HIV-1生命周期及与细胞的关系有了更新的`认识,启发人们发现基于Vpr蛋白的新型抗HIV-1疗法.该文介绍Vpr蛋白在HIV-1生命周期中的各种作用.

作 者:展鹏 刘新泳 ZHAN Peng LIU Xin-Yong  作者单位:山东大学药学院药物化学研究所,济南,250012 刊 名:生命的化学  ISTIC PKU英文刊名:CHEMISTRY OF LIFE 年,卷(期): 26(5) 分类号:Q5 关键词:HIV-1   Vpr   辅助蛋白   vpr  

篇10:植物生物反应器中重组蛋白产量低的原因及对策

植物生物反应器中重组蛋白产量低的原因及对策

包括种子蛋白质贮藏液泡、种子油体、植物悬浮培养细胞、毛状根和叶绿体在内的`植物生物反应器作为外源蛋白表达体系尽管已经获得了成功,但迄今为止,在植物生物反应器中仍存在重组蛋白产量低的关键问题.原因可能是重组蛋白在植物表达体系中容易被降解.因此,一种可能的解决方法就是,在转基因植物中将目标蛋白与蛋白酶抑制剂进行共表达,保护其不被降解,从而获得高产量的重组蛋白.

作 者:丁勇 龚秀会 刘小烛  作者单位:西南林学院资源学院,云南昆明,650224 刊 名:安徽农学通报 英文刊名:ANHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年,卷(期):2009 15(21) 分类号:Q946.1 关键词:植物生物反应器   重组蛋白   蛋白酶抑制剂   共表达  

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《植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用(精选10篇).doc》
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