以下是小编精心整理的植物组织培养的实验报告,本文共13篇,仅供参考,希望能够帮助到大家。

篇1:植物组织培养的实验报告
植物组织培养的实验报告
一、实验目的
1.掌握无菌操作的植物组织培养方法;
2.通过配置MS培养基母液,掌握母液的配置和保存方法; 3.通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法;
4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法; 5.了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理
(一)植物组织培养
植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。
(二)植物细胞的全能性
植物细胞的'全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
(三)组织的分化与器官建成
外植体诱导出愈伤组织后,经过继代培养,可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。有些情况下,外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
(四)培养基的组成
培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材
高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室 镊子、记号笔、橡皮筋、玻
璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料
豌豆种子
五、实验药品
药品 、70% 酒精、0.1% 升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。
六、实验步骤
篇2:植物组织培养
烟草的再生
前言 植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
在实践中,根据所培养的植物材料的不同,可以把组织材料分为5种类型,即愈伤组织、悬浮细胞培养、器官培养(胚、花药、子房、根和茎的培养等)、茎尖分生组织和原生质体培养。这5种培养类型虽然各有特点,但又相互有联系。例如,愈伤组织常常是悬浮细胞和原生质体的来源,但是很多情况下,悬浮细胞和原生质体最终又要通过形成愈伤组织才能产生再生植株。
19世纪30年代,德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说,根据这一学说,如果给细胞提供和生物体内一样的条件,每个细胞都应该能够独立生活。19,德国植物学家哈伯兰特在细胞全能性的理论是植物组培的理论基础。1958年,一个振奋人心的消息从美国传向世界各地,美国植物学家斯蒂瓦特等人,用胡萝www.unjs.cOm卜韧皮部的细胞进行培养,终于得到了完整植株,并且这一植株能够开花结果,证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞全能的预言。植物组培的简单过程如下:剪接植物器官或组织――经过脱分化形成愈伤组织――再经过再分化形成组织或器官――经过培养发育成一颗完整的植株。植物组培的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁,使之露出原生质体,然后放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织。不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做愈伤组织。在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化,产生出植物的各种器官和组织,进而发育成一棵完整的植株。 植物组织培养具有很多优点。第一,其培养条件可以人为控制,摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,
便于稳定地进行周年生培养。第二,其生长周期短,繁殖率高。第三,管理方便,利于工厂化生产和自动化控制,与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动,可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。
组织培养一方面可为转基因育种提供理想的受体材料,另一方面又可为常规的植物改良程序提供一种新的手段,从而使很多用传统方法难以解决的问题迎刃而解,更多更快地创造出各种农作物和园艺植物的新品种、新类型和新种质。总的来看,组织培养在植物改良中发挥了主要的作用,相信随着培养的技术不断的进步,其将会发挥更大的作用。
一、实验目的
1. 了解与掌握植物组织培养的原理和过程。
2. 了解与学习植物组织培养的相关操作技术。
3. 通过学习植物组织培养技术学习自我总结、自我反思,让自己在今后的学习与生活中也能像做组织培养那样细心、有条理。
二、实验原理
动物细胞的分化一般是不可逆的,植物则不同。只要具有一个完整的膜系统和一个有生命力的核,即使是已经高度成熟和分化的细胞,也还保持着回复到分生状态的能力。
把已分化组织中不分裂的静止细胞从母体植株上分离下来置于一种能促进细胞增殖的培养基上培养,细胞内就会发生某些变化,例如在休止期间由于溶酶体的破坏活动而丧失了功能的细胞组分又恢复了功能等,从而使细胞进入分生状态。一个成熟转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称作“脱分化”。在组织培养中,把如上述由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体。外植体通常都是多细胞的,并且组成它们的细胞常常包括各种不同的类型,因此由一个外植体所形成的愈伤组织也是异质性的,其中不同的组分细胞具有不同的形成完整植株的能力,即不同的“再分化”能力。
一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称这为细胞的全能性(Cell
totipotency)。换句话说,细胞全能性是指植物细胞具有全套遗传信息,不管是性细胞还是体细胞,在特定环境下仍能进行表达,而产生一个独立完整的个体。
细胞一旦脱离了母体植株,摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约,在一定的培养条件下,就会发生一种回复变化,从而失去分化状态,变为分生细胞,实现脱分化过程。然后,这些脱分化细胞经过连续的.有丝分裂,形成愈伤组织,即指在人工培养基上外植体长出来的一团无序生长的薄璧细胞。
脱分化细胞不断进行分裂,从而形成了愈伤组织,愈伤组织在培养基上生长一段时间以后,由于营养物质枯竭,水分散失,以及代谢产物的积累,必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代。
当试管苗在瓶内长满并长到瓶塞,或培养基利用完时就要转接,进行继代,可迅速得到大量试管苗,以便到一定数量时进行移栽。能否保持试管苗的继代培养,是能否得到大量试管苗和能否用于生产的重要问题。
因此,按培养过程可分为初代培养和继代培养两种类型:
(1)初代培养(Primary culture):指外植体的最初培养。
(2)继代培养(Subculture):将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养,称为继代培养。
若按照组织培养的材料可分为:(1)组织、器官或细胞培养:指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养,使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
(2)原生质体培养:指将微生物或植物细胞游离成原生质体,在适宜培养条件下,依据细胞全能性使其再生细胞壁,并进行细胞分裂分化,形成完整个体的技术。
篇3:植物组织培养
脱分化
再分化
三、实验材料和仪器
材料:烟草的叶片, MS培养基所需的各类药品,蔗糖,琼脂,1mol/L的NaOH,
1mg/ml的6―BA,70%酒精,升汞溶液,无菌水
仪器:电子天平,玻璃棒,大烧杯,移液管,洗耳球,量筒,搪瓷杯,电炉,
pH计,漏斗,牛皮纸,培养皿,组培瓶,锥形瓶,滤纸,高压蒸汽灭
菌锅,无菌操作台,镊子,解剖刀,酒精灯
四、实验步骤
(一)配制母液
1.根据书上的相关数据计算配制母液所需药品的用量,和小组其他成员检查核对数据,确定用量。(具体用量见表1)
2.将所需的药品准备好,按照表1的数据进行母液的配制,配制好后写好标签,按顺序摆放好母液。
注意事项:
1.计算配制母液药品用量时要小心仔细,不要出现计算错误。计算完毕后应和小组成员仔细核对,以确保计算无误。
2.在称取药品时一定要看清药品的名称和用量,例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。
3.配制完母液后要写清标签,切勿弄混。
(二)MS培养基制备
1..在搪瓷杯里加入适量的水,按照表2,依次将溶液加入搪瓷杯中,搅拌。
2..将所得溶液定容到1L,调pH值,使pH=6.0。
3.称取琼脂条10g,放入搪瓷杯中,放于电炉上加热,待琼脂条完全融化后将其
移开,置于室温下冷却。
4.待其冷却一会儿(不烫手时)后将其分装,总共分装18瓶。用牛皮纸包好瓶
口,扎上棉线。
5.将其和组培瓶、剪刀、镊子、培养皿、滤纸、装有适量水的锥形瓶放入高温灭
菌锅中灭菌。表1
表2
注意事项:
1. 调试pH值要在加热之前,因为温度会影响溶液的pH。
2. 在加热过程中要有人照看,以免溶液因为沸腾而喷洒出来。
3. 在分装时一定要小心,勿将液体培养基倒在瓶口上,如不小心沾上,要小心擦拭干净。
(三)初代培养的接种
1. 将所需用具组培瓶、培养皿、滤纸、镊子、解剖刀、无菌水从灭菌锅取出,准备好75%的酒精,升汞,酒精棉,酒精灯,将它们按一定顺序排好待用。
2..接种前用酒精棉擦手,然后换一块酒精棉擦拭工作台面,再换一块酒精棉擦拭镊子和解剖刀,在等待酒精挥发的同时将锥形瓶的棉线解开,将棉线理好后放在腿上。
3.采集一片长势完好的烟草叶片,用75%酒精浸泡数秒钟,然后用升汞溶液浸泡3min到5min,之后取出,用无菌水漂洗3次。
4.将消毒后的叶片置于无菌滤纸上,用解剖刀将叶片边缘和两端切去,留下主脉及其附近的叶肉,后将剩下的叶片切成1cm2左右大小的外植体。
5.左手拿装有培养基的锥形瓶底部,右手轻轻取下包头纸,将锥形瓶的瓶口靠近酒精灯火焰,瓶口倾斜,。然后用灼烧后冷却的镊子将外植体移入瓶中,叶片背面与培养基接触,轻轻按压使植物能紧贴培养基。镊子使用后放回消毒酒精中,将瓶口在火焰上旋转灼烧数秒钟,后包扎好瓶口,作好标记。
6.定期观察烟草的叶片的生长状况,及时记录并拍照。
注意事项:
1.用酒精棉给手和台面以及镊子和解剖刀消毒时要离酒精灯远一点,待酒精挥发干后才可以靠近酒精灯,避免发生危险。
2.用升汞消毒时要避免消毒时间过长,以免破坏其组织。在消毒过程中要适时晃动一下组培瓶,使叶片与升汞充分接触。
3.切叶片时切忌切的太小。
4.取下的牛皮纸向下摆放,放好叶片再次用牛皮纸包上锥形瓶之前要用火烧一下瓶口,切忌牛皮纸碰到瓶口。
五、实验结果
第一次观察
第二次观察
六、实验分析与讨论
通过照片可以看出,此次实验成功地长出了愈伤组织。愈伤组织在培养基上生长一段时间以后,由于营养物质枯竭,水分散失,以及代谢产物的积累,必须转移到新鲜培养基上培养。此次实验由于课时的限制,所以只进行了初代培养。
植物组织培养是看似简单实则是很不容易的一门技术。它要求我们每次做实验都必须要认真、仔细、有条理。不管是哪一次实验,只要其中的一个环节出错,就有可能导致整个实验的失败。所以,认真仔细有条理是做组培的基本条件。
在这次实验中,经过回想与总结,得出了以下的一些经验:
1.大量元素的配制:
首先是要确定药品,不要将药品名称看错。例如不要将K2HPO4 看成是KH2PO4。 这两样东西看起来虽然差不多,其实会对实验产生很大的影响。KH2PO4是酸性的,在此
次实验中和其他药品不会产生沉淀,而K2HPO4是碱性的,在此次实验中会和Mg2+形成
沉淀,影响实验。在配制大量元素无机盐母液时,还要防止在混合各种盐类时产生沉淀,各种药品必须在充分溶解后才能混合,同时在混合时要注意先后次序,把钙离子(Ca2+)、锰离子(Mn2+)、钡离子(Ba2+)和硫酸根离子(SO42-)、磷酸根离子(PO43-)错开,以免KH2PO4和MgSO4与CaCl2等发生作用,相互结合生成硫酸钙、硫酸钡、磷酸钙或磷酸锰沉淀。在混合各种无机盐时,其稀释度要大,慢慢地混合,同时边混合边搅拌。
2.微量元素的配制:
在配制微量元素混合母液时也要注意药品的添加顺序,以免产生沉淀。
3.铁盐的配制:
铁盐必须单独配制,因为与其他母液混合容易产生沉淀,在培养基中,采用螯合铁的形式配制,即硫酸亚铁和Na2-EDTA的混合物,在pH值7.6~8.0时也可保证铁的供应源。
4.母液的保存:配制好的母液应分别贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期。
5.MS培养基配制过程,要注意调试pH是在加热之前,不能加热之后再调pH,因为温度会对其产生影响,会导致pH偏大。在分装的过程中要注意不要将培养基倒在瓶口
上,这样容易受污染。如不小心瓶口沾上,要小心将其擦拭干净。
6.初代培养接种过程,在开始的时候不要急着做实验,要将所有的东西准备好,先在大脑里演示一遍整个实验的过程以及注意事项,确定无误后再开始做实验。实验过程中一定要保持头脑冷静,做到有条不紊。
整个组培的学习过程是有趣的,通过这次的学习,知道了自己的一些不足,在以后的学习生活中,我会一点一点的改正。
篇4:植物组织培养实验教学研究
植物组织培养实验教学研究
植物组织培养是现代生物技术的'重要组成部分,也是园艺专业学生的必修课程.近几年,在植物组织培养实验教学大纲修订、实验内容设计、资源合理利用、实验考核等方面进行了研究和探索,取得了较好的实验教学效果.
作 者:张红 Zhang Hong 作者单位:德州学院农学系,山东德州,253023 刊 名:安徽农学通报 英文刊名:ANHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年,卷(期): 15(15) 分类号:Q943.1 关键词:植物组织培养 实验教学 技能训练篇5:植物组织培养的应用
植物组织培养的应用
植物组织培养技术是根据植物细胞具有全能性的'原理而发展起来的一门技术.植物组织培养已渗透到与之相关的农业、林业、园艺、医药等领域的多个学科,同时与其他技术结合创造了巨大的经济效益和社会效益.
作 者:骆冬洁 作者单位:衡水市农业环境与农产品质量监督管理站,河北衡水,053000 刊 名:科技风 英文刊名:TECHNOLOGY TREND 年,卷(期):2009 “”(1) 分类号:Q94 关键词:植物 组织培养 育种篇6:植物组织培养的原理是什么
植物组织培养根据植物细胞具有全能性的'理论,利用植物体离体的器官、组织或细胞以及原生质体,在无菌和相宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株。
用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上诞生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做愈伤组织。在适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化。
篇7:植物组织培养技术的研究进展论文
引言
植物组织培养是20世纪之初,以植物细胞全能性为理论基础发展起来的一门新兴技术,是指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体,在人工配制的环境里培养成完整的植株,也称离体培养或植物克隆。自19德国科学家Haberlandt提出植物细胞具有全能性理论, 到1934 年美国White 等用番茄根进行离体培养证实这一观点以来,植物离体培养技术在基础理论和应用研究,已广泛应用到植物生理学、病理学、药学、遗传学、育种以及生物化学等各个研究领域, 成为生物学科中的重要研究技术和手段之一[1]。近年来,随着科学技术的不断发展,植物组织培养新方法和新技术不断涌现,研究重点也由器官、细胞水平向分子、基因方向转移。21世纪,生物技术是最有生命力的一门学科,而植物组织培养作为一种基本的试验技术和基础的研究手段,被认为具有巨大的潜力。
一、植物组织培养新技术的研究
随着科学技术的发展和对植物组织培养技术的不断深入研究,一些新的培养方法和技术不断出现,为植物组织培养技术的不断优化和发展提供了新的途径。
1.新型光源的应用。
光是植物生长发育必不可少的重要因素之一,光照长短、光质、光周期对植物的生长、形态建成、光合作用、新陈代谢以及基因表达均有调控作用。传统的组织培养光源灯普遍存在寿命短、发热量大且不均以及发光效率不理想等缺点。LED作为植物组织培养光源早在1991年就有栽培试验。研究发现, 光质比例和光照强度可调的LED 光源比通常植物组织培养使用的荧光灯更能有效地促进试管苗的光合作用和生长发育。蒋要卫利用LED作为大花蕙兰组培苗光源的研究发现, LED光源可以显著改善大花惠兰试管苗的生长状况和提高其品质[2]。日本的田中道男等运用阴极荧光灯( CCFL)作为文心兰试管苗光源, 结果表明其地上部干、鲜重和试管苗的高度都有显著提高。另外田中道男等利用SILHOS作为生菜组织培养光源, 获得了高质量的组织培养苗。目前LED是组织培养中最有效的人工照明光源,而CCFL等新型光源是未来发展的主要方向。
2.开放组织培养技术。
传统的植物组织培养属于严格的封闭式培养,因而造成灭菌成本偏高、培养基易污染、外界环境调控难度大等缺点。而开放组织培养新技术是在外加抗菌剂的条件下,使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境,在自然开放的有菌环境中进行,恰好弥补了这些不足。赵青华等采用开放式组培技术,在培养基中添加抑菌剂,克服了非灭菌条件下魔芋组织培养污染问题,有效地简化了实验步骤,降低了生产成本[3]。何松林的研究表明在添加抗菌剂的开放式组培中,文心兰试管苗可正常生长[4]。开放式组织培养突破了封闭式培养的限制,从根本上简化了组织培养环节,使将来规模化开放式组织培养成为可能。
3.光独立培养技术。
光独立培养法又称无糖培养法,是指利用CO2代替葡萄糖作为植物组织培养的碳源,人工控制组织培养苗生长所需的光、温、水、气、营养等条件,促使组织培养苗快速转变为自养型的培养方式。一方面避免了由葡萄糖引起的杂菌污染;另一方面,增强了组织培养微环境的人工调控能力。屈云慧等以虎眼万年青为对象的无糖培养研究表明万年青再生芽的生根率高, 种苗质量也优于常规培养[5]。肖玉兰、丁永前等设计的全套无糖组织培养设备培育出的苗具有抽叶多、植株健壮、节间距短、根系发达、干物重积累多、光合自养能力强等更优良的生物学性状。目前,无糖培养法还处于理论研究和应用的开始阶段,随着理论研究的不断深入及相关配套技术的不断完善, 必将成为组织培养技术的一种重要手段。
4.多因子综合控制技术。
近年来,随着对植物组织培养机理的深入研究和交叉学科间的相互促进作用,多因子综合控制的环境调控设施越来越多的应用到实际生产中,大大降低了组织培养成本, 促进了组织培养苗商品化的`进程。崔谨等运用CO2 监控系统对甘薯组培苗进行调控的结果表明, 在CO2监控系统方式下培养的甘薯组培苗, 具有生长迅速、光合产物积累明显、叶色深绿、根系发达等特点[6]。刘文科等设计了一种新型密闭式组培室, 并研制出一套用于该组培室的综合环境控制系统[7]。李传业等设计的一套能对组培箱内CO2浓度、相对湿度进行调控的组织培养微环境控制系统试验结果表明, 组织培养箱内CO2摩尔分数和相对湿度达到了预期目标。
二、植物组织培养的应用研究
植物组织培养技术的应用主要理论基础有两方面。一是细胞全能性,植物修复与完善、快繁脱毒苗、育种、种子和种质资源保存、植物检疫等都是其发展和应用的成果。二是悬浮培养液,主要应用于植物次生代谢产物的提取。
1.“全能性”的应用。
植物修复与完善是模拟植物组织培养过程中器官形成和细胞增殖形成的一套全新理论, 植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组织培养应用最多、最有效的一个方面,因其快速、无毒的特点,已经广泛应用于观赏植物、园艺作物、经济林木、无性繁殖作物,并已形成产业化、商品化。植物组织培养技术为培育优良作物品种开辟了新的途径,利用该技术,通过花药和花粉培养、胚胎培养与细胞融合、细胞无性系变异、基因工程及突变体筛选等手段,已经培育出一大批具有优良性状的植株。借助植物组织培养技术保存种子和种质资源,因其优于常规方法的特殊性越来越受到重视,已在1000多种植物种和品种上得到应用, 并取得很好的效果。
2.愈伤组织或悬浮培养液的应用。
植物次生代谢物如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱及其他活性化合物是许多医药、食品、香料、色素、农药和化工产品的重要原料, 其需求量逐年增加。目前,利用组织培养技术提取植物次生代谢产物因其高效率、高产量的优势已成为主流。用组织培养方法生产微生物以及人工不能合成的药物或有效成分的研究, 正在不断深入, 有些已投入工业化生产,预计今后将有更大发展。
三、展望
植物组织培养技术不仅是植物生物学和生物化学领域研究的一个重要的工具,在分子生物学和农业生物技术的研究中也具有重要意义。未来,一方面植物组织培养会借助更多的高新新技术向高效化、智能化、产业化方向发展。另一方面,在生产应用上会不断开辟新的领域。但是, 长期以来, 组织培养几乎停留在试验研究上, 在应用生产方面仍有许多局限性。因此, 今后对植物组织培养技术的应用方面需要进一步研究, 以充分发挥它的应用潜力。
篇8:浅谈动物组织培养与植物组织培养的区别
浅谈动物组织培养与植物组织培养的区别
从目的、起源、外植体种类、培养器皿、培养基种类、激素、碳源、温度、光照等方面分析阐述了动物组织培养与植物组织培养的区别.
作 者:石晓云 作者单位:邢台学院生物化学系,河北邢台,054001 刊 名:邢台学院学报 英文刊名:JOURNAL OF XINGTAI UNIVERSITY 年,卷(期): 24(4) 分类号:Q813.1 关键词:动物 植物 组织培养 区别篇9:植物组织培养教学实习项目总结
一、前言
(1)植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。该技术能应用于植物离体快繁、无病毒苗木培育、培育新品种或创制新物种、次生代谢产物生产、植物种质资源的离体保存、人工种子等。而组织培养的实习能够将课本中所学的理论知识应用于实践,开拓我们的视野,扩大我们的知识面,对于提高我们的探究意识和创新、动手操作能力具有很重要的意义。
(2)植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础,是指每一个植物细胞带有该植物的全部遗传信息,在适当的条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株。
(3)茅膏菜具有较大的药用价值和研究价值但种子萌发率低,因此可利用种子繁殖获得无菌苗后在进行快繁。
二、实习项目
茅膏菜的组织培养
三、实习目的
(1)复习、巩固和植物组织培养的基本理论和基本知识,同时进一步丰富所学知识;
(2)了解茅膏菜的形态、习性、种类、用途的多样性以及它们与环境的关系,激发学习的积极性;
(3)理论联系实际,通过自主学习和研究性学习培养独立工作能力和创新意识;
(4)重点掌握茅膏菜组织培养的基本操作技术及方法;
四、实习时间安排:
(1)-11-18、2012-11-24、2012-11-25在图书馆查阅茅膏菜及组织培养的相关资料;
(2)2012-12-1至2012-12-2去奇正藏药厂药材种植基地参观,采集茅膏菜种子;
(3)2012-12-8至2012-12-13在植物组织培养实验室进行茅膏菜的快速繁殖实验;
(4)2012-12-14至2012-12-16撰写实习报告;
五、实习地点
(1)西藏农牧学院图书馆、电子阅览室
(2)奇正藏药厂药材种植基地(奇正藏药厂药材种植基地位于西藏林芝地区,全地区海拔500至7800多米,特殊的地形和气候,使这里各种物种资源十分丰富,而且没有受过污染。该种植基地目前已成功种植西藏高山红牡丹、茅膏菜、波棱瓜、翼首草、独一味、藏麻黄等多种药用植物)
(3)西藏农牧学院植物组织培养实验室(植物组织培养实验室具有进行该项技术的完整设备和条件 ,便于进行茅膏菜的组织培养)
六、实习材料及工具:自封袋 、采集箱 、三角纸袋 、高压灭菌锅、超净工作台、烧杯、镊子、剪刀、培养皿、三角瓶、酒精灯 、医用
脱脂棉、培养架、医用小推车、蛭石、河沙、园土、泥炭土、育苗盘、喷雾器、配制MS培养基所需母液、75%酒精、70%酒精、0.1%升汞、NAA、6-BA、甲醛、高锰酸钾、0.1%多菌灵、活性炭、茅膏菜种子
七、实习内容
(1)查阅资料
借助图书馆,电子阅览室查阅关于茅膏菜的生长习性,和其组织培养相关知识为实习提供技术支撑。
茅膏菜:【别名】石龙芽草、山胡椒、胡椒草、夏无踪、白花叶、黄金丝、滴水不干、山地皮、捕虫草、食虫草、柔鱼草、苍蝇草、捕蝇草、苍蝇网、珍珠草、露珠草、无风自动草。为茅膏菜科植物茅膏菜或光萼茅膏菜的全草。多年生草本,直立或有时呈攀援状,高9-32cm,有紫红色汁液。鳞茎状球茎紫色,直径约6mm。基生叶密集成近一轮或最上几片着生于节间伸长的茎上;退化基生叶线状钻形,长约2mm;不退化基生叶圆形或扁圆形,花时枯凋;茎生叶互生,盾状,半月形或半圆形,长2-3mm,边缘或叶上面有多数头状腺毛,分泌粘液,形成露珠状。茅膏菜属植物叶面密被分泌黏液的腺毛,当昆虫停落在叶面时,即被黏液粘住,而腺毛又极敏感,有物触及,便会向内和向下运动,将昆虫紧压于叶面。当昆虫逐渐被腺毛分泌的蛋白质分解酶所消化后,腺毛重新张开再次分泌黏液,故能常在叶片上见到昆虫的躯壳。这类植物本身有叶绿素,可以进行光合作用,但根系极不发达,因此靠捕食昆虫就能弥补其氮素养分的不足。
该植物全草含矶松素、茅膏醌、羟萘醌、氢化萘醌等多种醌类成分。腺毛分泌物含类似胰酶的蛋白酶。可用于治疗疮毒、瘰病。治胃痛,赤白痢,小儿疳积,跌打损伤。
生态环境:1.生于海拔1200-3650m的山坡潮湿地的松林下、草丛中或溪沟边。⒉生于山坡、溪边草丛、灌丛和疏林下。 分布:⒈分布于四川、贵州、云南和西藏。⒉分布于江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、海南、广西等地。
茅膏菜萌发培养基为:1/2MS培养基(pH=5.8),增殖培养基为1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1,生根培养基为1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2
(2)采集茅膏菜种子
采集地点:奇正藏药厂药材种植基地
采集时间:2012-12-1上午
(3)培养基的配制
按照MS培养基的扩大倍数配制所需培养基,待完全溶解后导入三角瓶中,用封口膜封好,放入高压灭菌锅中121℃,灭菌20min后取出培养基冷却至凝固。
(4)茅膏菜无菌苗的获得
先打开超净工作台上的紫外灯,用紫外线灭菌30min,然后将其关闭。
第一步:用滤纸将茅膏菜的种子包好,并用绳子进行捆扎。 第二步:先打开超净工作台上的紫外灯,用紫外线灭菌30min,
然后将其关闭。 第三步:用自来水清洗双手后,在超净工作台上点燃酒精灯后将双手及小臂用75%酒精擦拭。将捆扎好的种子用70%酒精消毒30s,然后用无菌水冲洗2-3次。
第四步:用0.1%的升汞将种子消毒12min,然后用无菌水冲洗5-6次。 第五步:用镊子将绳子解开,将种子放入垫有滤纸的培养皿中吸取种子表面的液体。然后将种子点接在1/2MS培养基(pH=5.8)表面。 第六步:将接种好的种子封好,放置在培养架上光照3000-4000LX,室温培养,30d。
(2)茅膏菜的增殖培养
将茅膏菜萌发出的无菌苗在超净工作台上剪去根,接种到增殖培养基1/2MS+6-BA0.1+NAA0.1,放置培养架上室温,光照3000-4000LX培养40d。
(5)茅膏菜的生根培养
增殖40d后,把茅膏菜适当高度的芽(3-4cm)在超净工作台上接种到1/2MS+活性炭0.5g/L+NAA0.2,进行生根培养,并观察记录生根率。结果:生根率为85%。
(6)生根苗的驯化
将培养瓶放在温室自然光照下培养,同时昼夜有明显温差,5-7d后再打开封口膜使瓶中温度降低,通气加强,2-3d后可移苗。
(7)生根苗的移栽
第一步:移栽基质的准备。将河沙:园土:泥炭土:(1:1:2)
和蛭石搅拌均匀。用甲醛和高锰酸钾进行熏蒸消毒并密封,3d后打开取出基质在阳光下暴晒,再装入育苗盘中。
第二步:幼苗出瓶后,先洗去粘附的培养基,用0.1%多菌灵溶液浸泡后移栽于基质中,种植密度为2-3cm×4-6cm。移栽完后一次性浇透水,并用0.1%多菌灵喷雾。当叶表面水珠消失后盖好保温薄膜,保持温度15-25℃,湿度在85%以上,同时注意通风,控制光照50%左右,每7-10d喷一次杀菌剂。
第三步:待小苗成活并长新,稍后可施稀薄的MS培养液作追肥,逐渐增强通风直至约2周后打开保湿薄膜即可,并统计移栽成活率。结果:移栽成活率为30%。
由此看出,茅膏菜移栽成活率较低,其原因分析有以下几点:(1)当前温度较低不利于茅膏菜的移栽(2)幼苗水分供需不平衡(3)试管苗老化(4)移栽过程中微生物感染(4)试管苗的健壮性差(5)过渡培养的环境条件不利于试管苗的生长
八、实习心得
(1)通过本次实习让我了解了更多关于茅膏菜的知识,基本掌握了进行茅膏菜组织培养的内容、步骤以及应该注意的问题,开拓了我的视野,在一定程度上提高了我的动手实践能力和操作技能。同时也让我对课本专业知识理解的更加深刻。
(2)实习中我也掌握了超净工作台、高压灭菌锅等仪器的使用及注意事项,同时也掌握了配制培养基的方法。
(3)通过去奇正藏药厂药材种植基地采集种子和管理员的介绍我学
到了关于独一味、翼首草、藏麻黄等藏药材知识,丰富了我的知识面,增进了我对藏药材的理解,提高了我对本专业的学习兴趣和探究意识。
(4)这次实习也增进了我们班级同学之间的了解,加强了我们同学和老师之间的友谊,增强了班级的团结力和凝聚力 。
(5)本次实习给了我们一次接近大自然的机会让我感受到自然之伟大,她留给我们如此多的宝贵财富,等待我们去发掘,去保护,去利用,我们再开发其研究价值的同时更应该懂得怎样以小代价换取大创造。
植物组织培养教学实习总结2
一、实习目的
1、通过野外观察,准确、熟练掌握和应用常用的植物形态学术语。
2、通过实习,进一步了解植物的多样性,掌握植物界各大类群以及种子植物的常见科、属的主要特点,认识和区分常见种子植物科、属、种,扩大和丰富植物分类学的知识范围。
3、验证、复习和巩固课堂和书本上所学的理论知识,做到理论联系。
4、学习懂得用科学的方法观察,研究植物的基本特征。
二、实习意义
1、通过实习可以培养学习科学的态度,吃苦耐劳的精神,严明的组织纪律性,团结协作精神。
2、利用野外实习可以很好的让同学们感受到祖国山河的壮丽,培养热爱自然,保护生态环境的意识。
3、野外实习不仅是对理论知识的验证和巩固、对课堂知识的补充和深化,同时也是对综合素质的全面锻炼和提高。野外实习对于激发同学们学习兴趣,培养观察能力、创新思维和动手能力具有重要意义。
三、实习收获
通过三次难得的实习机会(农博园,南山公园,岱王山),与植物的近距离接触。在老师的带领和讲解中,对植物的分类及辨别有了更加深入的理解。在实习中,我们常常被各种植物的不同形态吸引着,让我记忆尤深。现在我将自己熟悉的植物展现出来。
四、实习心得
在这短短的几次植物学野外实习中,我亲身体验了辨别植物、采集过程,在这个过程中,我领会了野外实习对专业的巩固和提高的重要性。它是检验理论的一块试金石;是课堂内与课堂外的互补;是理论与实践的统一;是教与学的互动;是感性和理性的升华。这几天的实习过程,也培养了我们吃苦耐劳的精神,提高了我们的综合与分析能力,让我们产生了对大自然的新奇与美丽的惊叹与热爱之情。我们学会了独立思考、团结互助、不停探索。
野外实习巩固了我们的课堂知识,让我们亲自体验了压制标本的过程。我们在实习过程中积极运用课堂知识去观察、识别各种植物、仔细辨别类似植物之间的不同之处。这样理论联系实际,不仅加深了我们对课本知识的印象,而且培养了我们对课本知识的运用能力。在实习过程中,我们欣赏到了大自然的美丽,烟台的风光。从这几次的实习中,我们收获颇多。
篇10:植物组织水势的测定实验报告
植物组织水势的测定实验报告
一、实验目的和要求
了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方法和它们的优缺点。
二、实验原理
小液流法测定新鲜白萝卜的组织水势。植物细胞是一个渗透系统。当组织水势低于溶液渗透势,组织吸水,溶液变浓,比重增加,小液流下沉。当组织水势高于溶液渗透势,组织失水,溶液变稀,比重下降,小液流上浮。当组织水势等于溶液渗透势,组织与溶液达到水分进出动态平衡,溶液浓度和比重不变,小液流不动。
压力室法测定海桐叶片组织水势,植物叶片通过蒸腾作用产生蒸腾拉力。导管中的水分由于内聚力的作用而形成连续的水柱。因此,对于蒸腾着的植物,其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用,使水分连贯地向上运输。当叶片或枝条被切断时,木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部。将叶片装入压力室钢筒,切口朝外,逐渐加压,直到导管中的液流恰好在切口处显露时,所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。
三、主要仪器设备
小液流法:白萝卜、打孔器、10ml离心管、小刀、镊子、注射器、1mol/L蔗糖溶液、甲基橙 压力室法:压力室
四、操作方法和实验步骤
小液流法:
1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M一系列不同浓度的蔗糖溶液(10mL),用力混匀。
2、分别取4ml不同浓度的溶液到另一组相应的试管中。每管加入厚度约为1mm的萝卜圆片,加塞放置30min。期间晃动(3-4次)。
3、用针蘸取少量甲基橙放入每支试管,混匀。
4、用注射器取少许黄色溶液,伸入对应浓度的蔗糖溶液中部,缓慢挤出一滴小液滴,观察小液滴移动方向并记录。
Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+toC) ×浓度
压力室法:
根据植物材料选取枝条(或叶片)型的压力室盖→将试样装入压力室盖的孔(或槽)中夹紧,压入压力室并顺时针旋转紧固。打开钢瓶阀门,使控制阀朝向加压,缓慢打开测定阀,使加压速率达0.1bar,仔细观察伸出压力室盖的植物样品,一发现木质部转湿润液体溢出,立即关闭测定阀,记录压力表读数。
组织Ψw(Mpa) = -0.1×压力室压力表读数
五、实验数据记录和处理
小液流法测定结果:
其他两个小组的实验结果:
根据公式计算得到萝卜组织液浓度
Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+t℃) ×浓度= -0.0083×(273+16 ) ×0.1=-0.240Mpa
萝卜组织液浓度约为0.1mol/L,水势约为-0.240Mpa
压力室法测定结果:
室温16℃,测出出水压力读数为13,水势 -1.3Mpa
六、实验结果与分析
1、比较多组的实验结果发现,各组实验数据差别较大,经分析认为通过小液流法测量的水势误差较大。
2、经分析认为萝卜切片厚薄和总质量不同、在空气中放置的'时间不同、萝卜片在溶液中的放置时间不同,均有可能造成小液流法实验数据的偏差。
3、通过小液流法测得的植物组织水势只是一个范围,如要得到更精确的实验结果,需要缩小梯度之间的浓度差,在0.5mol/L~0.2 mol/L之间设多个测量点。
七、讨论、心得
1、因为小液流法的人为因素误差较大,所以萝卜切片须尽量使大小厚薄均匀,切好后尽快同时放入到六个试管中,以减少人为误差。
2、由于萝卜和外界溶液渗透达到平衡需要一定的时间,所以将萝卜放入溶液后等待的时间不能过短,否则会引起实验误差,将萝卜切成薄片也是为了加快渗透作用。
3、使用注射器向原荣业中加入黄色的渗透平衡溶液时,应缓慢加入少量即可,如加入太快,会黄色溶液从针头向下喷出,会对液流运动方向的观察造成影响。
4、用压力室法测定植物的水势,可以直接从压力表上读出水势的数值,实验结果直观,但是也存在一些缺点,判断水刚从切面渗出难度较大,同时该实验方法仪器要求较高,且测量值受到环境气压的影响。
篇11:植物生长区域测定的实验报告
植物生长区域测定的实验报告
【实验目的】
1. 了解植物体内N、P、K测定的意义和方法
2. 掌握如何测定植物体中N、P、K的实验技能
【实验原理】
植物体主要由C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe等十几种元素组成,除此以外还包括Ca、Zn、Mn、B、Mo,但需要量较少。
在通常条件下,植物利用太阳光能,从空气中获得C,从水中获得氢和氧,而N、P、K等元素则是来源土壤肥力。在栽培过程中,能够知道植物的需要和土壤内N、P、K变动的情况,对考虑施肥措施是有帮助的,因此测定土壤及植物体内的N、P、K是很重要的。
硝态N测定:硝态N是硝酸的阴离子(NO3-),它是强氧化剂,所以鉴定N-离子几乎都用氧化反应,用二苯胺(C6H5)2NH的方法,这个方法的原理是在NO3-存在时二苯胺被硝酸氧化而显蓝色。
有效P和无机P测定:P与钼酸铵反应生成磷钼酸铵,然后以氧化亚锡作为还原剂时,使磷钼酸铵还原为“磷钼兰”(低价钼化合物混合物)溶液呈兰色。此法能测土壤有效P,过磷酸钙中有效P和植物体内的无机磷。
速效K的测定:四苯硼钠〔NaB(C6H5)4〕与钾离子生成白色沉淀为四苯硼酸钾〔KB(C6H5)4〕
【实验材料和试剂】
在完全培养液、缺乏N、P、K、Fe的营养液中培养四周的.玉米苗。
硝态氮试剂、磷试剂Ⅰ、磷试剂Ⅱ、K试剂、标准溶液1、5、10、20、40ppm。
【实验方法】
1. 植物组织浸提液制备
将植物剪成小块,称取1g,迅速倒入已沸腾的蒸馏水(约10ml)烧杯中,用毛细玻璃棒经常搅动,小火煮十分钟,煮液倒入10ml容量瓶中,另加少量蒸馏水,继续小火煮植物材料5分钟,浸提液倒入上述容量瓶内,再以少量蒸馏水洗植物材料,使最后容量为10ml。
植物组织在计算含量时要乘以10,因每克鲜组织稀释了10倍。
2. 硝态N测定
在白瓷板的凹内分别滴入1、5、10、20、40ppm的混合标准液1滴,然后将待测液(植物浸提液)分别滴入其他凹内,最后每个凹内各加5滴二苯胺硫酸溶液,用毛细玻璃棒搅匀,3-5分钟,观察标准液与待测液蓝色变化,待测液的蓝色近似于某标准液的蓝色,就是待测液的硝态N含量。
3. 有效P和无机P测定
在白瓷板的凹内,分别滴入1、5、10、20、40ppm混合标准液和待测液各5滴,然后加入钼酸铵硫酸溶液1滴,用毛细玻璃棒搅匀后,加入氧化亚锡甘油溶液1滴,搅匀,比较标准液和待测液的蓝色,求出待测液的有效P的含量(ppm),蓝色愈深,有效磷含量愈高。
4. 速效K测定
在透明凹玻璃的凹内,分别滴入1、5、10、20、40ppm混合标准液和待测液1滴,然后加四苯硼钠溶液1滴,十分钟后在阳光下比较标准液与待测液的白色混浊,找出相应的钾含量。
【实验结果】
(在制备浸提液时每克植物鲜组织稀释了10倍,所以在计算含量时要乘以10)
【实验结果分析】
1. 缺氮条件下培养的玉米苗生长缓慢,但叶绿素含量并未显著降低,但硝态氮含量明显少,说明大部分氮以有机态存在,而同时磷元素的含量非常低,说明氮元素影响磷的吸收,这可能是因为植物生长时,高氮素水平下的根系需要更多的NAD(P)H和ATP参与氮的代谢,从而增强磷的吸收,反之则减少磷的吸收,同时植物根系过低的代谢水平影响了钾离子的吸收。
2. 缺磷条件下培养的玉米苗磷含量相当低。是因为植株缺磷时,根保留其所吸收的大部分磷,地上部分发育所需的磷主要靠茎叶中磷的再利用,营养器官中的无机态磷含量明显下降。又因为缺磷时,作为抗逆机制,光合产物运到根系的比例增加,根部呼吸作用增强,吸收的其它的元素反而多,植株长势也好。
3. 缺钾情况下,磷含量降低,首先多种酶的活性取决于细胞质内钾离子的浓度,稳定的钾离子含量是细胞进行正常代谢的保证,更重要的是,钾的吸收可以使氢离子泵出,导致根外PH值降低并建立质子驱动力,同时使磷酸根载体质子化,促进磷的吸收,但钾元素不足,就影响了磷元素的吸收。
4. 缺铁情况下,磷的含量显著降低,可能是由于一种抗逆机制,因为无机磷的存在会进一步降低铁的有效浓度。
篇12:精选实验报告
一、实验目的
熟悉应用PHOTOSHOP 在图形处理中的操作,
二、实验内容
按照样张的样子把两张素材文件合并为一个图像文件。 保存文件为.psd (不得合并图层)
三、实验环境
实验应用系统及软件:WINDOWNS XP和PHOTOSHOP
四、实验步骤
1、从桌面上启动PHOTOSHOP
2、应用菜单栏中的“文件”菜单“打开”命令分别打开两个图形文件“城市风.JPG”和“云天.jpg”
3、应用“图象”—>“旋转画布”—>“水平反转画布”对文件“云天.jpg”进行转换。
4、使用方框工具选中中间图片,使用CTRL+j新建图层.
5、选择新建图层,并选择“魔术棒工具”大致选出“城市风光.jpg”文件中的建筑轮廓,并配合使用SHIFT、ALT键完成精细的选择。
6、使用“选择”菜单中的“反选”命令选中建筑图片拖动到云天图片中。
7、使用CTRL+T对图片进行自由变换使其符合云天图片大小。
8、保存文件名为xin.psd
五、实验结果
在实验中着重应用了PHOTOSHOP中的图片反转、图层的建立、图片中的扣图、图片的自由变换,基本达到了实验目标。
六、总结
实验过程中,开始我不知道如何去除图片中的背景、经过请教摸索终于掌握了其应用方法。个人方面我觉得初次接触PHOTOSHOP很有收获。
篇13:实验报告格式
学 生 实 验 报 告 书
实验课程名称 开 课 学 院 指导教师姓名 学 生 姓 名 学生专业班级
200
-- 200 学年 第 学期
实验教学管理基本规范
实验是培养学生动手能力、分析解决问题能力的重要环节;实验报告是反映实验教学水平与质量的重要依据。为加强实验过程管理,改革实验成绩考核方法,改善实验教学效果,提高学生质量,特制定实验教学管理基本规范。
1、本规范适用于理工科类专业实验课程,文、经、管、计算机类实验课程可根据具体情况参
照执行或暂不执行。
2、每门实验课程一般会包括许多实验项目,除非常简单的验证演示性实验项目可以不写实验
报告外,其他实验项目均应按本格式完成实验报告。
3、实验报告应由实验预习、实验过程、结果分析三大部分组成。每部分均在实验成绩中占一
定比例。各部分成绩的观测点、考核目标、所占比例可参考附表执行。各专业也可以根据具体情况,调整考核内容和评分标准。
4、学生必须在完成实验预习内容的前提下进行实验。教师要在实验过程中抽查学生预习情况,
在学生离开实验室前,检查学生实验操作和记录情况,并在实验报告第二部分教师签字栏签名,以确保实验记录的真实性。
5、教师应及时评阅学生的实验报告并给出各实验项目成绩,完整保存实验报告。在完成所有
实验项目后,教师应按学生姓名将批改好的各实验项目实验报告装订成册,构成该实验课程总报告,按班级交课程承担单位(实验中心或实验室)保管存档。 6、实验课程成绩按其类型采取百分制或优、良、中、及格和不及格五级评定。
实验课程名称:__通信原理_____________
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