下面小编给大家整理的大鼠骨髓间质干细胞的分离纯化与鉴定，本文共4篇，欢迎阅读与借鉴!
篇1：大鼠骨髓间质干细胞的分离纯化与鉴定
大鼠骨髓间质干细胞的分离纯化与鉴定
采用密度梯度离心法分离骨髓间质干细胞,差速贴壁法进行纯化,应用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜等对纯化细胞进行鉴定,结果细胞表面抗原CD29,CD44,CD105,CD166 表达呈阳性,而 CD14,CD34,CD45表达呈阴性.采用RT-PCR鉴定了三个基因:nestin,NST,Oct-4,前两者呈阳性表达,后者弱阳性表达.这些细胞特异抗原与基因表达综合起来,表明得到的细胞具备骨髓间质干细胞的特性.密度梯度分离与差速贴壁相结合,可获得较好均一性的`骨髓间质干细胞,是一种简单可靠、易于推广的骨髓干细胞获取方法,可为细胞与组织工程研究提供种子细胞.
作 者：张荣利 冯雪 张会亮 罗国安 李连达 王义明 Zhang Rongli Feng Xue Zhang Huiliang Luo Guoan Li Lianda Wang Yiming 作者单位：张荣利,冯雪,罗国安,王义明,Zhang Rongli,Feng Xue,Luo Guoan,Wang Yiming(清华大学生命科学与医学研究院,北京,100084)张会亮,Zhang Huiliang(清华大学生命科学与医学研究院,北京,100084;山东师范大学生命科学学院,济南,250014)
李连达,Li Lianda(中国中医科学院西苑医院,北京,100091)
刊 名：中国工程科学 ISTIC英文刊名：ENGINEERING SCIENCE 年，卷(期)： 9(7) 分类号：Q789 Q813 关键词：大鼠 骨髓间质干细胞 流式细胞分析篇2：大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养表型鉴定与标记
大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养表型鉴定与标记
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养、表型鉴定和标记的方法,为临床进行细胞移植治疗心、肝、脑等器官急性衰竭提供种子细胞.方法无菌条件下取大鼠股骨、胫骨和腓骨,用冲洗法冲出骨髓,用直接贴壁法分离纯化MSCs,体外扩增,用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的MSCs进行鉴定,并检测第3代MSCs的.细胞周期.结果体外培养的原代MSCs 72 h内可见有少量贴壁细胞,7 d左右达到汇合.免疫细胞化学示,MSCs CD29、CD44、CD73、CD105、CD166表达阳性,而CD14、CD34、CD45表达阴性.流式细胞仪示,CD14阳性率为0.19%、CD29为64.36%、CD34为0.17%、CD44为86.73%、CD45为0.18%、CD73为90.21%、CD105为74.25%、CD166为54.60%.细胞周期显示,第3代MSCs约有90%的细胞处于G0/G1期.结论MSCs在体外很容易分离培养和扩增,DAPI标记MSCs敏感性好,标记效率高,可作为标记细胞的一种有效手段,MSCs体外培养成功为细胞移植治疗急危重症器官衰竭提供新的治疗途径.
作 者：何忠杰 马俊勋 方驰华 杨丽萍 作者单位：何忠杰,马俊勋(南方医科大学附属珠江医院普通外科,广东,广州,510280)方驰华(中国人民解放军总医院304急救部,北京,100037)
杨丽萍(中国人民解放军总医院304烧伤研究所,北京,100037)
刊 名：中国急救医学 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CRITICAL CARE MEDICINE 年，卷(期)： 25(12) 分类号：Q503 Q813.1+1 关键词：骨髓间充质干细胞 分离培养 表型 细胞周期 大鼠 流式细胞仪篇3：大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定了细胞周期及CD29,CD44,CD45和HLA-DR的.表达.结果表明,在体外培养条件下大鼠MSCs贴壁生长,为成纤维细胞样;CD45和HLA-DR的表达呈阴性,CD29和CD44的表达呈阳性;细胞周期的G0/G1期约占95%,具有原始细胞的特征.说明建立的体外培养扩增体系可获得形态单一、生长稳定、增殖性较强、较均一的大鼠MSCs.
作 者：李延清 刘霞 LI Yan-qing LIU Xia 作者单位：李延清,LI Yan-qing(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000)刘霞,LIU Xia(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100)
刊 名：西北农林科技大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 34(5) 分类号：Q813.1+1 关键词：大鼠 骨髓间充质干细胞 细胞形态 细胞周期 密度梯度离心 流式细胞术篇4：大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究
大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究
目的:建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的.分离培养条件,以获得群体均一、未分化状态保持良好的MSCs.方法:收集不同周龄大鼠骨髓细胞;以不同浓度Percoll密度梯度离心分离骨髓单个核细胞;以60%低糖DMEM40%MCDB201为基础培养基,培养24h去悬浮细胞;以不同接种密度传代培养;碱性磷酸酶染色和油红O染色考察MSCs向骨和脂肪组织分化的潜能.结果:采用57%Percoll液的分离效果优于70%Percoll液.6周龄(体重约180g)大鼠能在细胞分离的质和量上达到最佳效果.24h进行悬浮细胞去除、5×103/cm2接种密度传代培养,光镜和电镜显示MSCs增殖能力强,功能状态活跃,成脂成骨实验显示多向分化潜能保持良好.结论:优化大鼠周龄、分离液的密度、细胞培养条件及改进培养方法有助于获得多向分化潜能保持良好的均一的MSCs.
作 者：晏丹 舒赛男 YAN Dan SHU Sai-nan 作者单位：晏丹,YAN Dan(武汉科技大学医学院病理教研室,湖北,武汉,430065)舒赛男,SHU Sai-nan(华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030)
刊 名：现代生物医学进展 ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)：2008 8(1) 分类号：Q813.1 关键词：间充质干细胞 分离 培养 优化★家蚕抗菌蛋白Cecropin D和Lysozyme的分离纯化及性质鉴定
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