下面是小编为大家整理的牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定，本文共6篇，以供大家参考借鉴!
篇1：牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
通过IPTG诱导的`大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定.获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000.
作 者：李超 林祥梅 余多慰 李全芬 李桂芬 韩雪清 作者单位：李超,余多慰,李全芬(南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046)林祥梅,李桂芬,韩雪清(中国检验检疫科学研究院,北京,100029)
刊 名：动物医学进展 PKU英文刊名：PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 31(4) 分类号：S852.43 关键词：牛γ干扰素 单克隆抗体 鉴定篇2：抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及初步鉴定
抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及初步鉴定
目的: 制备抗鸡γ-干扰素单克隆抗体(mAb).方法: 应用淋巴细胞杂交瘤技术,以重组菌BL21(DE3)(pET-ChIFN-γ)表达产物的包涵体作为抗原免疫BALB/c鼠,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测抗原,制备抗鸡γ-干扰素mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和Western blot鉴定mAb的特异性.结果: 获得2株可稳定分泌抗鸡γ-干扰素mAb的`杂交瘤细胞株1G5、5E3,其Ig亚类均为IgG2a,腹水mAb 1G5、5E3的ELISA效价分别为1:1 600 000,1:120 000.在Dot-ELISA试验中,这2株mAb均只与表达His-ChIFN-γ及GST-ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,与未表达这2种IFN-γ的其他8种菌株均不发生反应.在蛋白质印迹试验中,2株mAb均能与融合蛋白GST-ChIFN-γ、His-ChIFN-γ发生反应,出现特异性条带.结果表明,mAb 1G5、5E3是针对鸡γ-干扰素的特异性mAb.结论: 成功地制备抗鸡γ-干扰素的mAb,它们在免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节研究等方面有应用价值.
作 者：戴华 焦新安 潘志明 黄金林 胡茂志 唐伟 刘秀梵 DAI Hua JIAO Xin-an PAN Zhi-ming HUANG Jin-lin HU Mao-zhi TANG Wei LIU Xiu-fan 作者单位：扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 22(4) 分类号：Q813.2 关键词：鸡γ-干扰素(ChIFN-γ) 单克隆抗体篇3：抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定
抗双氯青霉素单克隆抗体的制备与初步鉴定
采用碳化二亚胺法,将双氯青霉素(dicloxacillin)与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的`脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选,阳性杂交瘤细胞用有限稀释法克隆,获得1株可稳定分泌McAb的杂交瘤细胞5D4-C9-C8;间接ELISA方法测定,其细胞上清抗体效价为1:300,腹水效价为1:3.5×105,为IgG1,与其结构类似物邻氯青霉素、苯唑青霉素的交叉反应率分别为17.6%和26.1%,与苄青霉素、羟氨苄青霉素和氨苄青霉素均无交叉反应性.体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定.为进一步研制检测双氯青霉素的ELISA试剂盒奠定了基础.
作 者：王琳 齐孟文 冯才伟 孟丽丽 WANG Lin QI Meng-wen FENG Cai-wei MENG Li-li 作者单位：中国农业大学,北京,100094 刊 名：中国预防兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)：2006 28(5) 分类号：Q819 关键词：β-内酰胺抗生素 双氯青霉素 单克隆抗体篇4：人胎盘层粘连蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
人胎盘层粘连蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
目的 获得能特异性识别人层粘连蛋白(hLN)的单克隆抗体(McAb).方法 用纯化的人层粘连蛋白(hLN)作抗原免疫Balb/C小鼠,以细胞融合、酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选和克隆化技术获得抗hLN的杂交瘤细胞株;用生物学方法鉴定杂交瘤细胞,用免疫学方法鉴定McAb的特异性.结果 获得4株稳定分泌抗人LN的杂交瘤细胞株(2A1、3B5、2C4、4D1),培养上清的ELISA效价分别为:1:512、1:1 024、1:512、1:256;腹水效价分别为:1×106、1×107、1×106、1×105;采用ELISA相加法表明2A1、4D1与3B5、2C4识别的hLN上的抗原决定簇和识别的不同,4株单抗均属实IgG.结论 成功建立了4株稳定分泌抗人LN McAb的`杂交瘤细胞株,它们分别识别hLN上2个不同的抗原位点,有望作为hLN定量检测的特异性抗体.
作 者：曾宪威 蒋艺勤 肖静 杨元好 ZENG Xian-wei JIANG Yi-qing XIAO Jing YANG Yuan-hao 作者单位：广东省深圳市宝安区松岗人民医院检验科,深圳,518105 刊 名：热带医学杂志 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE 年，卷(期)： 7(7) 分类号：Q513.2 关键词：层粘连蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 制备篇5：无色孔雀石绿单克隆抗体的制备与鉴定
无色孔雀石绿单克隆抗体的制备与鉴定
用人工合成的无色孔雀石绿-牛血清白蛋白(LMG-BSA)作为抗原免疫BALB/c小鼠,并利用杂交瘤技术建立了1株稳定分泌无色孔雀石绿(LMG)单克隆抗体的'杂交瘤细胞2E6.经鉴定表明,杂交瘤细胞染色体数为(99.12±3.60),间接竞争ELISA(ciELISA)显示LMG 50%抑制质量浓度为20.39μg/L,诱生小鼠腹水的抗体效价达2.3×105.与水产养殖中常见的禁用激素和抗菌药物的交叉反应小,表明该单抗具有较好的敏感性和特异性.
作 者：王敏 王权 蔡小丽 王希春 吴金节 WANG Min WANG Quan CAI Xiao-li WANG Xi-chun WU Jin-jie 作者单位：王敏,蔡小丽,王希春,吴金节,WANG Min,CAI Xiao-li,WANG Xi-chun,WU Jin-jie(安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036)王权,WANG Quan(中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点试验室,上海,32)
刊 名：畜牧与饲料科学 英文刊名：ANIMAL HUSBANDRY AND FEED SCIENCE 年，卷(期)： 30(3) 分类号：Q813.2 关键词：无色孔雀石绿 单克隆抗体 问接竞争酶联免疫吸附反应篇6：抗牛型结核分支杆菌单克隆抗体的制备和鉴定
抗牛型结核分支杆菌单克隆抗体的制备和鉴定
运用杂交瘤细胞技术,以牛型结核分支杆菌免疫Balb/c小鼠,用其超声波裂解液筛选杂交瘤细胞,得到了2株能稳定分泌抗牛型结核杆菌抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5D4和4C3,并对它们的特性作了初步鉴定.经鉴定,2株单克隆抗体均为IgG1 亚类.腹水经ELISA检测,效价可达1∶1×104～1∶1×105,同时分析了2株单抗的抗原位点,结果表明2株单抗针对不同的`抗原位点.单抗的特异性试验结果显示,2株单抗与大肠杆菌,沙门氏菌,金黄色葡萄球菌等均没有反应,但都与人型结核分支杆菌有不同程度的交叉反应.并应用免疫胶体金技术制备牛结核杆菌胶体金快速诊断试纸条做应用性鉴定.该试纸条只与结核杆菌发生反应,而不与沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、李氏杆菌等发生交叉反应.该试纸条最低能检测出浓度为1×106个/mL的牛结核杆菌菌液,有较高的灵敏度.
作 者：朱德全 杜惠芬 李克生 余四九 ZHU De-quan DU Hui-fen LI Ke-sheng YU Si-jiu 作者单位：朱德全,余四九,ZHU De-quan,YU Si-jiu(甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070)杜惠芬,李克生,DU Hui-fen,LI Ke-sheng(甘肃兰州雅华生物技术有限公司,甘肃,兰州,730030)
刊 名：甘肃农业大学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2006 41(5) 分类号：Q785 关键词：牛型结核分支杆菌 单克隆抗体 制备 鉴定
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